[发明专利]用于纯化至少一种待鉴定的靶物质的方法

摘要

本发明公开用于纯化至少一种待鉴定的和在培养细胞时在细胞培养基中存在或形成的靶物质的方法。在所述方法中，将靶物质选择性附着于其官能化表面的磁性粒子，即珠，加入到细胞培养基中，并通过应用磁场将靶物质附着的粒子从细胞培养基中选出。所述方法的特征在于下列步骤：提供血清替代物，所述血清替代物获自天然血清，并且不具有或几乎不具有最大质量为60kDa、特别是最大质量为10kDa的低分子物质；将所述血清替代物与已包含细胞或向其中加入了细胞的细胞培养基相混合；在富含血清替代物的细胞培养基中培养所述细胞；分离至少一些在所述培养过程中形成的细胞培养物上清液；通过超滤处理的方式，过滤所述细胞培养物上清液，以获得保留物；以这样的方式提供所述珠，所述方式是所述珠的官能化表面包括若干个包含多至10个分支、即10代的树状聚体，每个树状聚体最后一代的末端点受到修饰；将所述珠和所述保留物与缓冲溶液相混合，以获得混合物；培养包含在所述保留物中的靶物质，并使其与所述珠固定；并从所述混合物中磁性选择出所述磁珠。

主权项

1. 用于纯化至少一种在培养细胞时在细胞培养基中存在或形成的待鉴定靶物质的方法，在所述方法中，将磁性粒子加入到所述细胞培养基中，所述磁性粒子它们称为珠，在所述磁性粒子的表面上进行官能化且所述靶物质选择性附着于所述磁性粒子的表面，并且通过应用磁场，从所述细胞培养基中选择所述靶物质附着的粒子，所述方法特征在于下列方法步骤：-提供血清替代物，所述血清替代物获自天然血清，并且不具有或几乎不具有质量小于或等于60kDa、特别是小于或等于10kDa的低分子物质，-将所述血清替代物加入到所述细胞培养基中，所述细胞培养基已包含细胞或向其中加入了细胞，-在富含血清替代物的细胞培养基中培养所述细胞，-分离至少一些在所述培养过程中形成的细胞培养物上清液，-通过超滤方法，过滤所述细胞培养物上清液，以获得保留物，-以这样的方式提供所述珠，所述方式是所述珠的官能化表面包括多个每个包含多至10个分支，即10代的树状聚体，每个树状聚体最后一代的末端点被修饰，-将所述珠和缓冲溶液加入到所述保留物中，以形成混合物，-温育包含在所述保留物中的靶物质，并使其与所述珠结合，并从所述混合物中磁性选择出所述磁珠。