[发明专利]一种抗沙门菌单链抗体与跨膜蛋白融合蛋白的制备方法有效
| 申请号： | 200710305386.7 | 申请日： | 2007-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN101469333A | 公开（公告）日： | 2009-07-01 |
| 发明（设计）人： | 吕建新 | 申请（专利权）人： | 温州医学院 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/70;C12N15/74;C12Q1/04;C07K19/00;C12R1/42 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 325035浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用于制备抗沙门菌属O抗原单链抗体和跨膜蛋白的融合蛋白的方法。本发明还涉及包含所述融合基因的表达型重组体、包含所述表达型重组体的工程菌、由此工程菌表达和分离纯化的目的融合蛋白scFvLH-pVIII(和scFvHL-pVIII)以及此融合蛋白用于沙门菌属的临床检验诊断以及食品卫生诊断。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 沙门 菌单链 抗体 膜蛋白 融合 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】：
1、一种抗沙门菌单链抗体与跨膜蛋白融合蛋白的制备方法，其特征在于采用下列步骤：1)利用PCR的方法分别扩增单链抗体scFv的轻链VL cDNA和重链VH cDNA以及M13丝状噬菌体主要衣壳蛋白pVIII成熟肽DNA，并采用重叠延伸拼接PCR的方法利用两个连接肽GGGGSGGGGSGGGGS编码基因将三段基因连接成融合基因，包括scFv LH-pVIII融合基因和scFv HL-pVIII融合基因；2)在表达载体中分别克隆scFv LH-pVIII融合基因和scFv HL-pVIII融合基因；3)用重组载体转化大肠杆菌；4)发酵培养工程菌，制备和纯化融合蛋白。
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