[发明专利]一种无标记转基因蔬菜的获得方法

摘要

一种无标记转基因蔬菜的获得方法涉及蔬菜转基因技术，尤其涉及无标记转基因技术的改进，属于植物生物工程领域。本发明就是一种无标记转基因蔬菜的获得方法。本发明包括以下步骤：(1)转化处理；(2)组织培养；(3)分割处理；(4)分子检测；(5)植株再生；(6)植株鉴定。本发明适用于所有可组织培养成功的植物。

主权项

1、一种无标记转基因蔬菜的获得方法，其特征在于包括以下步骤：(1)、转化处理：转化的受体是外植体或愈伤组织，采用农杆菌介导转化，或用基因枪介导转化；(2)、组织培养：将转化处理后的外植体诱导成愈伤组织并通过培养进一步扩增，将转化处理后的愈伤组织通过培养进一步扩增；(3)、分割处理：将转化后形成的愈伤组织切分成尽可能小的小块，小块的体积≤1mm3，待小块长大后用直接对基因进行检测的方法对有目标基因的细胞或组织进行追踪，通过多次的分割处理，分割处理次数≥2次，确定出转化愈伤的具体分布，然后从转化愈伤组织密集区的中心区域选取转化了的愈伤组织分化植株或进行进一步的分割、鉴定及植株再生；(4)、分子检测：用PCR等可直接对目标基因进行检测的方法选出有转化的愈伤组织；(5)、植株再生：将选出的转化了的愈伤分化成再生植株；(6)、植株鉴定：对再生植株逐一进行鉴定，保留所有最上部两个叶片均为阳性的植株。