[发明专利]重组人VIP-Humanin融合蛋白制备方法无效
申请号: | 200710129894.4 | 申请日: | 2007-08-01 |
公开(公告)号: | CN101144080A | 公开(公告)日: | 2008-03-19 |
发明(设计)人: | 陈劲春;常婧 | 申请(专利权)人: | 北京化工大学 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C07K19/00;C12N15/62;C12P21/02 |
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地址: | 100029北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 发明专利名称:重组人VIP-Humanin融合蛋白制备方法技术领域:本发明涉及生物工程、食品工程、保健品领域。本发明采用DNA重组技术,根据大肠杆菌偏爰密码,设计、合成了串联共表达人VIP-Humanin融合蛋白的编码基因并由BamHI和SaCI定向克隆进pET28a(+);筛出阳性克隆之后,挑取一个单菌落对其发酵条件和产物分离纯化工艺进行优化处理。发酵3h左右OD600达到0.6~0.7时,加入诱导剂至终浓度1mmol/mL,诱导表达4h目标蛋白合成达到高峰,粗蛋白采用Ni-螯合亲和层析进行初分,DEAE-sepherose离子交换柱纯化,经重组肠激酶酶切纯化后获得rhVIP-Humanin融合蛋白。采用Tricine-SDS-PAGE,RP-HPLC和MALDI-TOF-TOF-MS等表征确认所制备的蛋白是rhVIP-Humanin。它将用于防治老年痴呆症。 | ||
搜索关键词: | 重组 vip humanin 融合 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种重组人VIP-HN融合蛋白的制备方法,其特征在于,采用基因工程菌发酵法生产,而不是从天然存在的生物材料中制备。
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