[发明专利]重组人VIP-Humanin融合蛋白制备方法无效

专利信息
申请号: 200710129894.4 申请日: 2007-08-01
公开(公告)号: CN101144080A 公开(公告)日: 2008-03-19
发明(设计)人: 陈劲春;常婧 申请(专利权)人: 北京化工大学
主分类号: C12N15/09 分类号: C12N15/09;C07K19/00;C12N15/62;C12P21/02
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
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摘要: 发明专利名称:重组人VIP-Humanin融合蛋白制备方法技术领域:本发明涉及生物工程、食品工程、保健品领域。本发明采用DNA重组技术,根据大肠杆菌偏爰密码,设计、合成了串联共表达人VIP-Humanin融合蛋白的编码基因并由BamHI和SaCI定向克隆进pET28a(+);筛出阳性克隆之后,挑取一个单菌落对其发酵条件和产物分离纯化工艺进行优化处理。发酵3h左右OD600达到0.6~0.7时,加入诱导剂至终浓度1mmol/mL,诱导表达4h目标蛋白合成达到高峰,粗蛋白采用Ni-螯合亲和层析进行初分,DEAE-sepherose离子交换柱纯化,经重组肠激酶酶切纯化后获得rhVIP-Humanin融合蛋白。采用Tricine-SDS-PAGE,RP-HPLC和MALDI-TOF-TOF-MS等表征确认所制备的蛋白是rhVIP-Humanin。它将用于防治老年痴呆症。
搜索关键词: 重组 vip humanin 融合 蛋白 制备 方法
【主权项】:
1.一种重组人VIP-HN融合蛋白的制备方法,其特征在于,采用基因工程菌发酵法生产,而不是从天然存在的生物材料中制备。
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