[发明专利]一种乳粉中乳糖含量测定方法

摘要

本发明属于一种乳粉中乳糖含量测定方法。该方法是根据色度学原理结合乳糖和发色剂作用生成桔红色的络合物，即不同乳糖含量的样品经沉淀蛋白质后，在苯酚、氢氧化钠、苦味酸和亚硫酸氢钠作用下生成深浅不同的桔红色络合物，其色度值与乳糖含量高低呈线性相关，用计算机软件自动分析获得样品色度值，然后计算乳糖含量。本发明利用普通的办公用计算机与扫描仪代替了实验室专用的精密仪器—分光光度计，省去了SN/T 0871－2000方法中人工绘制标准曲线和计算乳糖含量的步骤，可以一次测定多个乳粉样品，自动化程度高，操作快速、简便。适用于乳粉中乳糖含量实际测定的需要。

主权项

1.一种乳粉乳糖含量分析方法，乳糖在苯酚、氢氧化钠、苦味酸和亚硫酸氢钠作用下生成桔红色的络合物，此方法的特征在于，该方法是根据色度学原理结合传统的显色方法，用计算机软件自动分析获得样品色度值，然后通过建立色度值与乳糖含量间的关系，计算乳粉中乳糖含量，具体步骤如下：步骤1：配制溶液配制乳糖标准工作液：准确称取于70℃真空烘箱中烘至恒重的适量的乳糖标准品(纯度≥99％)，加水溶解，移入容量瓶中，稀释至刻度，配成浓度为1mg/mL的标准工作液；配制发色剂：1％～5％(v/v)苯酚溶液，3％～10％(v/v)氢氧化钠溶液，1％～5％(v/v)苦味酸溶液，1％～5％(v/v)硫酸氢钠溶液；使用时，按顺序以体积(1∶2∶2∶1)配制，此发色剂置于冰箱中可使用一周；配制沉淀剂：3％～10％(v/v)氢氧化钡溶液，3％～10％(v/v)硫酸锌溶液；步骤2：试样处理称取适量试样，用水溶解移入容量瓶中，稀释至刻度。并准确移取定量于离心管中，加入硫酸锌溶液，氢氧化钡溶液，用小玻璃棒轻轻搅匀后，以约6000r/min的转速离心10min，取上层澄清液作为样液，供测定用；移取样液分别置于比色管中，加入发色剂，准确移取不同量的乳糖标准工作液，分别置于含发色剂的比色管中；将样液和乳糖标准液的比色管，塞紧塑料塞，移入沸水浴中，加热6min，取出，用冷水冷却后，用水稀释，摇匀；步骤3：采集图像：将样液和乳糖标准液各取等量体积移至比色池中，将比色池置于扫描仪上，启动扫描仪采集图像；步骤4：读取乳糖含量：利用计算机系统读取图像采集器采集到的原始图像信息；点击“检测”菜单中的“参数设置”，根据提示输入标样的标号和标样的乳糖含量；根据标样的色度值和乳糖含量，利用RQS1.0图像分析软件自动绘制标准曲线和采集到的待测样品的色度值，采用回归方程计算待测样品乳糖的含量；初始参数确定后点击“结果”，比较后确定检测样品的乳糖含量，并根据需要打印输出。