[发明专利]一种矮壮素和缩节胺残留量的测定方法

摘要

本发明公开了一种矮壮素和缩节胺残留量的测定方法，属于食品安全检验技术领域。一种矮壮素和缩节胺残留量的测定方法，包括如下步骤：(一)样品前处理；(二)液相色谱－串联质谱(LC/MS－MS)法测定处理后的待测样品中矮壮素和缩节胺残留量；(三)制定标准曲线及结果判定。本发明的优点在于：建立了简便的样品前处理方法，开发了先进色谱分离技术，借助先进的仪器，建立了检测速度快、灵敏度高(检出限＜0.005mg/kg)的检测方法。本方法能满足应对欧盟、美国和日本对相关产品安全检测的技术要求，将为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。

主权项

1.一种矮壮素和缩节胺残留量的测定方法，包括如下步骤：(一)样品前处理：准确称取经充分混匀的样品1份(g)，加二次水定容至适当体积(ml)，2500r/min以上旋涡混匀1min，超声波提取20-30min，8500-10000r/min离心10min，取上清过孔径为0.2μm的滤膜，待测；(二)液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)法测定处理后的待测样品中矮壮素和缩节胺残留量：100％乙腈：0.1％甲酸5～15mM乙酸铵溶液＝60∶40、经HILIC液相色谱柱分离；电喷雾正离子(ESI+)、多反应监测模式(MRM)为定量离子和定性离子进行MS测定；MRM分析参数：针对矮壮素，监测离子对为121.87＞57.86和121.87＞62.74，驻留时间均为0.1secs，碰撞能量分别为25和20V，锥孔电压均为30V；针对缩节胺，监测离子对为113.96＞57.84和113.96＞97.81，驻留时间均为0.1secs，碰撞能量均为20V，锥孔电压均为42V；(三)制定标准曲线及结果判定：1.标准曲线：准确称取经充分混匀的空白样品1份(g)，加二次水定容至适当体积(ml)，通过前处理步骤制备基质溶液，然后将标准中间溶液用此溶液稀释至一系列标准溶液，不过原点做标准工作曲线，以所得响应值(峰面积)Y与浓度x进行回归分析，建立矮壮素和缩节胺的回归曲线，线性相关系数要求均≥0.995；用二次水直接稀释标准中间溶液建立标准曲线，同样可以符合实验要求；2.定性标准：样品溶液按照液相色谱-串联质谱条件分别进行测定，进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与基质标准中矮壮素和缩节胺相一致，并且所选择的对应的两对离子对的丰度比相一致，则可判定为样品中存在矮壮素和缩节胺；3.定量标准：采用外标校准曲线法，用空白样提取液或纯水来配制所使用的一系列基质标准工作溶液，然后分别进样绘制标准工作曲线，并且应保证所测样品中农药的响应值均在线性范围以内；用外标法计算定量结果：$X=C\times \frac{V}{m}式中：X--试样中矮壮素或缩节胺残留量，单位为\mu g/kg；C--从标准曲线上得到的被测组分溶液浓度，单位为ng/mL；V--样品溶液定容体积，单位为mL；m--样品溶液所代表试样的质量，单位为g。$