[发明专利]一种动物细胞的超低温保存溶液及保存方法

摘要

本发明公开了一种动物细胞的超低温保存溶液及保存方法，用于保存细胞，特别是新鲜分离的原代动物细胞，如肝细胞，它是通过将已分离的动物细胞在37℃下预培养0～24小时后，将培养基切换成0～4℃的超低温保存溶液，然后在－80～－196℃下超低温保存0～48个月。保存结束后，采用新鲜细胞培养基在37℃条件下进行复苏培养，最后采用正常动物细胞培养基进行培养。在保存过程以及前后的培养基中采用添加中药有效成分以及其他化学保护剂，提高动物细胞经过超低温保存后的存活率以及细胞功能。本发明提出的离体动物细胞长期超低温保存技术，可以为生物人工肝及其他人工器官提供所需细胞的运输和保存手段，同时也可保存动物细胞用于其他医药研究领域。

主权项

1.一种动物细胞的超低温保存溶液，其特征在于，它包括动物细胞基础培养基、胎牛血清、二甲基亚砜和中药有效成分山莨菪碱、五味子乙素、甘草酸、苦参碱、丹参素、黄芪多糖、柴胡皂甙。所述动物细胞基础培养基、胎牛血清、二甲基亚砜的体积比为7∶2∶1，各中药有效成分的浓度分别为：山莨菪碱0～500mg/L、五味子乙素0～100mg/L、甘草酸0～100mg/L、苦参碱0～100mg/L、丹参素0～100mg/L、黄芪多糖0～100mg/L、柴胡皂甙0～100mg/L。