[发明专利]一种治疗习惯性流产的生物学制剂

摘要

一种治疗习惯性流产的生物学制剂，属医药技术领域。其技术方案是，抽取健康成年男性外周血；玻璃球脱纤维Hanks液1.5倍稀释，分离淋巴细胞，收集单个核细胞；Hanks液清洗，用RPMI－1640完全培养液重悬、计数，并调整细胞浓度至2×10⁶/ml，加入植物血凝素，37℃培养72h；收集培养液的上清，以离心超滤及蔗糖密度梯度离心法制备T细胞exosomes；用无菌滤膜过滤分装，－80℃保存即得成品。本发明能有效地诱导机体的免疫耐受，克服了免疫细胞过继疗法诱导免疫耐受的诸多不足，使临床应用更为简单易行；制剂可大规模工业化制备，使质量控制更为稳定、可控性更强。将其应用于治疗习惯性流产，取得良好的疗效。

主权项

1.一种治疗习惯性流产的生物学制剂，其特征在于，它以男性外周血为原材料，并按下述步骤进行：a.培养男性外周血T细胞：抽取健康成年男性外周血50mi；玻璃球脱纤维Hanks液1.5倍稀释，分离淋巴细胞，收集单个核细胞；Hanks液清洗，用RPMI-1640完全培养液重悬、计数，并调整细胞浓度至2×106/ml，加入植物血凝素(PHA)，使终浓度为100μg/ml；37℃培养72h；收集培养液的上清，4℃保存备用；b.制备T细胞exosomes：取上述外周血T细胞培养上清，以1500g离心10min去除细胞及细胞碎片；分子量100 000超滤管过滤浓缩5倍后；以30mg/ml蔗糖/D2O为密度垫，以100 000g超速低温离心75min，收集底部的缓冲垫；PBS稀释，100 000g超速低温离心75min，获得exosomes；0.22μm无菌滤膜过滤分装，-80℃保存备用。