[发明专利]体外筛选胰高血糖素样肽－1受体的多肽类激动剂的方法

摘要

胰高血糖素样肽－1受体(GLP－1受体)是当今公认的、最重要的抗糖尿病药物作用靶点之一。本发明涉及胰高血糖素样肽－1受体的多肽类激动剂的体外筛选方法及筛选得到的多肽。本发明公开了一种体外筛选胰高血糖素样肽－1受体的多肽类激动剂的方法，该筛选方法以重组的GLP－1受体蛋白的膜外N端片段(N－GLP－1R)为靶点，利用其体外结合能力，并结合噬菌体展示技术和Phage－ELISA技术而建立。本发明还公开了用该方法筛选获得的多肽序列。本发明公开的筛选方法简便、快捷，适合体外高通量筛选GLP－1受体多肽类激动剂，为开发治疗糖尿病的多肽类药物提供了新的方法和思路，节省了筛选时间，降低了开发成本。

主权项

1.一种体外筛选胰高血糖素样肽-1受体的多肽类激动剂的方法，包括下列步骤：a)采用噬菌体展示技术构建待选GLP-1受体的多肽类激动剂的噬菌体展示文库；b)先将N-GLP-1R包被在微孔反应板上，再将噬菌体展示文库加入微孔与包被的N-GLP-1R相互作用，而后将与N-GLP-1R特异性结合的噬菌体从微孔反应板上洗下，获得与N-GLP-1R特异性结合的噬菌体；c)将筛选得到的噬菌体感染宿主细胞，培养获得克隆，扩增后抽提噬菌体载体进行测序，获得与N-GLP-1R有特异性结合的多肽序列。