[发明专利]新生猪胰岛细胞分离、纯化和培养方法无效
| 申请号： | 200710036638.0 | 申请日： | 2007-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN101033460A | 公开（公告）日： | 2007-09-12 |
| 发明（设计）人： | 牛申 | 申请（专利权）人： | 牛申 |
| 主分类号： | C12N5/06 | 分类号： | C12N5/06 |
| 代理公司： | 上海浦一知识产权代理有限公司 | 代理人： | 王函 |
| 地址： | 201206上海市南*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种新生猪胰岛细胞分离、纯化和培养方法，其方法是从生长2～5天的新生猪供体中无菌剖腹取出胰腺，去除胰腺周边组织，注入消化液，其消化温度是37～39℃，消化pH值是6.0～8.0，其终止消化溶液包括小牛血清和Hank’s液；接着进行猪胰岛细胞的纯化和7～10天的细胞培养。通过本发明可获得供胰岛细胞分化与发育以及异种移植治疗糖尿病研究的猪胰岛供体，可达到通过异种胰岛细胞移植治疗糖尿病的目的，并为猪胰岛供体的产业化及异种胰岛细胞移植治疗技术的推广打下了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 生猪 胰岛 细胞 分离 纯化 培养 方法 | ||
【主权项】：
1、一种新生猪胰岛细胞分离、纯化和培养方法，依次包括如下步骤：1)分离猪胰岛细胞，从生长2～5天的新生猪体内无菌剖腹取出胰腺，去除胰腺周边组织，注入消化液，其消化温度是37～39℃，消化液PH值是6.0～8.0，加入含有效量小牛血清的冷Hank’s液终止消化；2)纯化步骤1)得到的猪胰岛细胞，配置比重液，于0.5～1.0ml的消化清液中，加入0.3～1.0ml的含有效量小牛血清的冷Hank’s液，再依次取10～15ml的比重液注入，摇荡混匀，静置3～5min，低速离心沉淀细胞；3)将步骤2)得到的猪胰岛细胞加培养基进行7～10天的细胞培养；4)形成猪胰岛细胞团。
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