[发明专利]家猪B淋巴细胞刺激因子cDNA及其克隆方法和重组应用无效
申请号: | 200710020916.3 | 申请日: | 2007-04-03 |
公开(公告)号: | CN101089179A | 公开(公告)日: | 2007-12-19 |
发明(设计)人: | 张双全;管政兵 | 申请(专利权)人: | 南京师范大学 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C07K14/47;A61K38/17;A61P37/00 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 | 代理人: | 卢亚丽 |
地址: | 210097*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 猪B淋巴细胞刺激因子cDNA及其克隆方法和重组应用,涉及生物基因工程领域。猪B淋巴细胞刺激因子的基因,具有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的序列。其克隆方法如下:根据B淋巴细胞刺激因子的保守序列设计引物;从猪脾脏提取总RNA;通过RT-PCR方法,扩增出一段cDNA,命名为P1,克隆入pMD18-T载体,测序;应用cDNA末端快速扩增方法,根据P1的序列设计正义引物及反义引物分别用以扩增出上述cDNA 3’-及5’-全长末端区域,扩增片段分别命名为P2及P3,分别克隆入pMD18-T载体,并测序;将P1、P2、P3拼接出cDNA全长序列,并设计首尾引物一步扩增出全长cDNA序列,克隆入pMD18-T载体,挑取阳性克隆进行测序。所述猪B淋巴细胞刺激因子的cDNA可通过现有基因工程方法,生产重组duck BAFF,作为猪类免疫增强剂。 | ||
搜索关键词: | 家猪 淋巴细胞 刺激 因子 cdna 及其 克隆 方法 重组 应用 | ||
【主权项】:
1、猪B淋巴细胞刺激因子cDNA,其特征在于,具有SEQ ID NO.1所示的序列。
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