[发明专利]一种双色荧光定量共扩增聚合酶链反应检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种双色荧光定量共扩增聚合酶链反应试剂盒，首先根据21号染色体特异DSCR区段序列和16号染色体上的GAPDH基因序列分别合成其特异引物和双色Taqman探针，然后在同一扩增缓冲反应体系中，经过45个PCR循环，使两对引物分别同时引导新链合成，实现两对引物的共扩增。在PCR扩增的同时检测扩增过程中由于降解Taqman探针获得的荧光信号的强弱变化情况，获得各自的扩增曲线图，进而得出各个基因的Ct值。从而计算它们的拷贝数比值，再根据两个基因拷贝数的比值进一步判断21号染色体的倍性。

主权项

1.一种双色荧光定量共扩增聚合酶链反应试剂盒，含有扩增21号染色体特异单拷贝区段DSCR和16号染色体特异单拷贝区段GAPDH体外扩增的荧光定量PCR试剂，其特征在于，首先根据21号染色体特异的DSCR区段序列和16号染色体上的GAPDH基因序列分别合成其特异引物和双色Taqman荧光探针，然后将0.1-0.5umol/L DSCR和GAPDH特异的引物、双色荧光Taqman探针加入同一个PCR扩增缓冲反应体系中，在多色实时荧光定量PCR仪上进行96℃预变性2min后，再94℃变性10sec，52-56℃复性30sec，60-70℃延伸40sec，共45个循环，并在延伸时检测荧光强度，使两对引物分别同时引导新链合成，实现两对引物的共扩增和其拷贝数的定量检测。