[发明专利]烟草黄瓜花叶病毒田间快速检测试纸条的制备方法

摘要

本发明公开了一种烟草黄瓜花叶病毒田间快速检测试纸条的制备方法，包括制备抗体、制备胶体金、制备胶体金－抗体结合物、制备硝酸纤维素膜和制备胶体金层析检测试纸的步骤。采用上述技术方案制备的烟草黄瓜花叶病毒田间快速检测试纸条，检测适温15～35℃，检样量0.1～0.3g的样品，相当于叶面积大约3～5cm²；将烟叶在装有缓冲液的塑料袋中研磨后，将试纸条浸入，30min出结果；假阳性率低于1％。可见本发明使用方便，特别适用于田间快速检测，并且可靠性很高。

主权项

1.一种烟草黄瓜花叶病毒田间快速检测试纸条的制备方法，包括制备抗体、制备胶体金、制备胶体金-抗体结合物、制备硝酸纤维素膜和制备胶体金层析检测试纸的步骤，其特征在于：在制备抗体的步骤中，要制备兔多克隆抗体：用无菌生理盐水将烟草黄瓜花叶病毒抗原稀释为2mg/ml，然后加Freund’s佐剂，第一次为完全佐剂，以后用不完全佐剂；抗原注射量为0.1～0.2mg/kg，选用2～3Kg的兔子，采取静脉注射方式，分三次完成，每次注射抗原用量0.03～0.1mg，间隔时间为10d，末次注射10d后进行放血，放血前动物禁食12h，采用耳静脉放血40～60ml，收集后离心除去血细胞，纯化后零下20℃保存；并用同样的方法制备羊抗兔抗体。