[发明专利]脂肪酶的仿生亲和纯化方法有效
| 申请号： | 200610119253.6 | 申请日： | 2006-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN1970745A | 公开（公告）日： | 2007-05-30 |
| 发明（设计）人： | 李荣秀;唐克轩;姚红艳;董德贤 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N9/20 | 分类号： | C12N9/20 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 | 代理人： | 王锡麟;张宗明 |
| 地址： | 200240*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种脂肪酶的仿生亲和纯化方法，属于工业生物技术领域的。本发明包括下列步骤：(1)制备仿生亲和分离材料：首先用带氨基的基础层析介质与三氯三氮嗪进行反应，然后在50℃与烯丙胺反应，最后在95℃与环己胺反应，合成仿生亲和分离材料；(2)用仿生亲和分离材料纯化脂肪酶粗品：用上述制备的仿生亲和分离材料装入层析柱，得到亲和层析柱，随后将含脂肪酶的样品上至该亲和层析柱中，脂肪酶被柱中仿生亲和分离材料专一地吸附留在层析柱中，其它不能被吸附的蛋白随缓冲液流出，最后用洗脱缓冲液将脂肪酶从柱中专一洗脱下来，得到纯脂肪酶。本发明能够高效率、低成本的大规模生产高纯度的脂肪酶。 | ||
| 搜索关键词： | 脂肪酶 仿生 亲和 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1、一种脂肪酶的仿生亲和纯化方法，其特征在于，包括下列步骤：(1)制备仿生亲和分离材料首先用带氨基的基础层析介质与三氯三氮嗪进行反应，得到基础层析介质氨基二氯三氮嗪，然后在50℃温度下与烯丙胺反应得到1-基础层析介质氨基-2-胺丙烯一氯三氮嗪，最后在95℃温度下与环己胺反应，得到1-基础层析介质氨基-2-胺丙烯基-3-胺环己基三氮嗪，称为仿生亲和分离材料；(2)用仿生亲和分离材料纯化脂肪酶粗品用上述制备的仿生亲和分离材料装层析柱，随后将含脂肪酶的样品上至该亲和层析柱中，脂肪酶被柱中仿生亲和分离材料专一地吸附留在层析柱中，其它不能被吸附的蛋白随缓冲液流出，最后用洗脱缓冲液将脂肪酶从柱中专一洗脱下来，得到纯脂肪酶。
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