[发明专利]从牛、羊血液中提取超氧化物歧化酶的方法

摘要

本发明公开了一种从牛、羊血液中提取超氧化物歧化酶的方法，它将新鲜的牛血液或羊血液经过抗凝、沉淀、3－6级的温度剃度处理、盐析、超滤及浓缩、冷冻干燥等生产步骤处理后即可同时得到比活和纯度略有不同的两组超氧化物歧化酶成品，与现有技术相比，本发明具有工艺简单、生产周期短、产品收率及比活高、质量稳定、成本低等特点，经济效益十分显著。

主权项

1、一种从牛、羊血液中提取超氧化物歧化酶的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)、在新鲜的牛血液或羊血液中加入占血液重量0.2-0.5％的抗凝剂，在温度为4-8℃的低温下放置30-100分钟，待溶液分层，去掉大部分上清液后得到沉淀；(2)、将上述沉淀由室温迅速加温至40-50℃，保温10-30分钟后迅速降至室温，4000-6000转/分钟离心10-30分钟后去除沉淀，得到上清液；(3)、将上述上清液进行3-6级温度梯度处理后得到上清液a；(4)、对上清液a进行两级盐析：首先加入硫酸铵，使盐析液饱和度为45-70％，充分搅拌使硫酸铵完全溶解，在温度为4-8℃下放置12-36小时后，4000-6000转/分钟离心10-30分钟后去除沉淀，得上清液b；继续在上清液b中加入硫酸铵，使盐析液饱和度为85-95％，充分搅拌使硫酸铵完全溶解，在温度为4-8℃下放置12-36小时后，4000-6000转/分钟离心10-30分钟，收集沉淀，得到沉淀一，余下的上清液在温度为4-8℃下放置12-36小时，用G4磨沙漏斗进行抽滤，收集沉淀，得到沉淀二；(5)、用浓度为0.05-0.2M、pH＝7.0的磷酸钾缓冲液分别溶解沉淀一和沉淀二，完全溶解后超滤去除残留的硫酸铵，经浓缩和冷冻干燥后，即可分别得到比活和纯度略有不同的两组超氧化物歧化酶成品。