[发明专利]一种治疗男性秃发药物的制备方法及其在临床中的应用

摘要

本发明涉及一种药物的制备方法，特别是涉及一种治疗男性秃发药物的制备方法。药物的前体为含15％人AB型血清的基础培养基，该基础培养基按15ml人AB型血清、85ml低糖培养基(DMEM)、0.24gHepes、0.2g碳酸氢钠、0.03gL－谷氨酰胺配比构成。用基础培养基培养低传代人毛乳头细胞，收集低传代人毛乳头细胞培养上清为人毛乳头细胞条件培养液，将所收集的人毛乳头细胞条件培养液制备成冻干粉。本发明所制备的药物在治疗男性秃发中有明显的疗效，本药物所用细胞和培养血清对人体均无抗原性，用于人体无任何过敏反应。此外，本发明所用药物为皮下注射，其有效药物利用度大大提高，其制备工艺十分考究，实用性强，能为广大患者服务。

主权项

1、一种治疗男性秃发药物的制备方法，其特征在于：用含人AB型血清的基础培养基培养低传代人毛乳头细胞，收集低传代人毛乳头细胞培养上清，将所收集上清液制备成冻干粉；(1)上述人AB型血清制备的步骤为：a)采集健康献血员全血200ml入无抗凝剂的血袋；b)将全血血袋37℃水箱中放置1小时；c)2000rpm离心30分钟；d)用血清分离器分离人AB型血清；e)将人AB型血清在56℃水箱中放置1小时去除补体，注意其上下温差应小于0.5℃；f)在超净台上用2％碘酊消毒血清袋出液管5分钟，空干；g)用已消毒好的剪刀剪去封口帽，将血清倒入已消毒好的100ml瓶中；h)用吸管分装为15ml/瓶，-20℃冻存备用；(2)上述的基础培养基的制备方法：基础培养基：将15ml人AB型血清与85ml低糖培养基(DMEM)，0.24gHepes，0.2g碳酸氢钠，0.03g L-谷氨酰胺混匀后，用0.22微米孔径的微孔滤膜过滤除菌，直接使用或-20℃冻存备用；(3)人毛乳头细胞条件培养液的收集过程为：a)取意外死亡的正常健康青年枕后一手掌大小头皮，用二步酶法分离人毛乳头；b)培养时在50ml培养瓶中加入5ml基础培养基，100ml培养瓶中加入7ml基础培养基，3天换一次基础培养基；c)开启超净台并用紫外线消毒30分钟，操作时着隔离衣，戴一次性口罩和帽子，用75％酒精消毒双手后在超净台上将低传代人毛乳头细胞培养上清从培养瓶中无菌倒入50ml无菌离心管中，用旋丝口盖盖上离心管并拧紧，在离心机中离心；d)在超净台上打开离心管，用无菌吸管吸出离心管中的上清，移入无菌玻璃容器中，加无菌橡皮塞后，作好标记，-20℃冻存备用。(4)人毛乳头细胞条件培养液的冻干过程为：a)冻干室紫外线消毒4小时；b)操作时着隔离衣，戴一次性口罩和帽子，用75％酒精消毒双手后在超净台上用无菌吸管将药物分为3ml/冻干瓶，盖上瓶塞且留出冻干孔；c)将冻干瓶放入冻干机中；d)连续冻干过程：I -40℃ 4小时II -20℃ 3小时III -5℃ 10小时IV 5℃ 4小时V 15℃ 3小时VI 25℃ 5小时e)在真空环境下，真空封包冻干瓶；f)打开冻干机冻干室门，取出冻干瓶，加瓶盖并加压封包瓶塞；g)贴上标签，注明标识和日期，4℃保存备用。