[发明专利]减轻微阵列测定中的非特异性结合

摘要

采用一种孵育后处理方法能有效除去结合测定中可能与微阵列基材非特异性结合的靶分子(如蛋白质/蛋白质复合物)或其它带有标记的分子。孵育后用含有消化剂如消化酶(蛋白酶)或溶酶体的液体进行一步洗涤，所述消化剂能有效除去基材上的非特异性结合靶分子或至少该靶分子的标记部分。使蛋白酶结合或涂布在大分子或固体颗粒，颗粒的大小阻止它们进入3D水凝胶微斑点的多孔表面，因此不能到达和消化沉积在这种多孔水凝胶微斑点内的标记的靶分子－探针复合物。蛋白质被消化的含有标记的节段(或基本上全部蛋白质)被洗涤液带走因此在摄像时不产生背景噪声。

主权项

1.一种测定待分析样品中一种或多种靶分子的存在的方法，所述方法包括：提供具有上表面的基材，在所述表面附加多个三维多孔水凝胶微斑点，在所述多个微斑点的各孔内提供不同捕获剂而在所述表面形成微阵列，使所述微阵列接触含有靶分子的溶液，靶分子的大小能结合所述多孔水凝胶微斑点内的所述捕获剂，所述接触后用含有消化剂的液体洗涤所述微阵列，除去所述表面上的非特异性结合靶分子或至少其标记部分，而不影响与所述多孔水凝胶微斑点内捕获剂特异性结合的靶分子，如果在所述结合时所述靶分子不含标记，则在所述洗涤之前或之后使标记与所述靶分子连接，和测定所述洗涤后的微阵列以检测结合在特定微斑点内的标记靶分子产生的信号。