[发明专利]用于生产多肽的信号肽

摘要

本发明涉及包括使用信号肽生产多肽的方法，涉及含有编码信号肽的第一核苷酸序列和相对于第一核苷酸序列是外源的编码多肽的第二核苷酸序列。另外，还涉及含有所述核酸构建体的表达载体和宿主细胞。

主权项

1.生产分泌多肽的方法，包括：(a)在有助于生产多肽的培养基中培养真菌宿主细胞，其中该宿主细胞包含核酸构建体，该核酸构建体包含与编码该多肽的第二核苷酸序列可操作地相连的编码信号肽的第一核苷酸序列，其中第一核苷酸序列相对于第二核苷酸序列是外源的，第一核苷酸序列的3′端紧接着第二核苷酸序列的上游，且第一核苷酸序列选自如下组成的组中：(i)编码具有与SEQ ID NO：1有至少70％同一性的氨基酸序列的信号肽的核苷酸序列；(ii)与SEQ ID NO：2具有至少70％同源性的核苷酸序列；和(iii)在严格条件下与SEQ ID NO：2的核苷酸，或其互补链杂交的核苷酸序列，其中严格条件定义为在低于计算的Tm 5℃至10℃的0.9M NaCl，0.09M Tris-HCl pH7.6，6mM EDTA，0.5％NP-40，1X Denhardt′s溶液，1mM焦磷酸钠，1mM磷酸二氢钠，0.1mM ATP和每ml 0.2mg酵母RNA中预杂交、杂交和杂交后洗涤，并在低于计算的Tm 5℃至10℃下，在加0.1％SDS的6XSCC中洗涤15分钟一次并使用6X SSC洗涤两次各15分钟；和(b)从培养基中分离分泌的多肽。