[发明专利]线粒体DNA11778点突变检测方法及试剂盒

摘要

本发明涉及一种基因检测方法及试剂盒，旨在提供一种基于分子荧光探针PCR线粒体DNA11778点突变检测方法及试剂盒。本发明首先判定标本中是否存在线粒体DNA11778点突变，然后在线粒体基因组保守区设计引物，在线粒体11778位点设计与靶序列互补的分子探针，再进行PCR扩增过程。本发明具有、定量功能，未知样品可以根据Ct值换算成样品含量，准确性好、有效防污染、操作简单、耗时短、结果判断直观明确。

主权项

1、一种线粒体DNA11778点突变检测方法，其特征在于包括下述步骤：(1)细胞基因组DNA的提取，包括外周血单个核细胞分离和DNA提取；(2)在分子探针的存在下，对提取的细胞基因组DNA进行PCR扩增；(3)测定PCR反应体系的荧光强度，判定标本中是否存在线粒体DNA11778点突变；所述PCR扩增使用了PCR引物，在线粒体基因组保守区设计引物序列为：MT-1：5’-CATCCTCATTACTATTCTGCCTAGCA-3’；MT-2：5’-GGAGTAGAGTTTGAAGTCCTTGAGAGA-3’；所述分子探针：在线粒体11778位点设计与靶序列互补的分子探针，5’端用FAM标记，另一端用MGBNFQ标记，其序列为：MT-3：5’-FAM-CACTCACAGTCACATCA-MGBNFQ；MT-4：5’-VIC-AGGATTATGATGCGACTGT-MGBNFQ。