[发明专利]一种基于基质辅助激光解吸电离源质谱靶板的蛋白酶解方法无效
| 申请号： | 200510030676.6 | 申请日： | 2005-10-20 |
| 公开（公告）号： | CN1773275A | 公开（公告）日： | 2006-05-17 |
| 发明（设计）人： | 张祥民;于文佳 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N1/28;G01N30/72 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 姚静芳 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生化分析技术领域，是一种基于基质辅助激光解吸电离源(MALDI)质谱靶板的蛋白质快速酶解方法。现有的传统蛋白酶解存在耗时长和需要大量蛋白变性剂等缺点，不适合用于复杂生物样品中蛋白的大规模分离后所要求的高效酶解及质谱测定。本发明是在MALDI(基质辅助激光解吸电离源)靶板上加入蛋白和蛋白酶并在适当的pH和温度下进行快速有效酶解，随后进行质谱鉴定。本发明可实现复杂生物样品中蛋白分离、酶解及质谱鉴定等操作步骤的连续自动化。该酶解方法具有操作简单、灵敏度高、无需蛋白变性剂及低耗等优点，十分适合应用于复杂生物样品中蛋白的快速分离鉴定，在蛋白质组学研究等领域有良好的实用价值和应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 基质 辅助 激光 解吸 电离 源质谱靶板 蛋白酶 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于基质辅助激光解吸电离源质谱靶板的蛋白酶解方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将蛋白样品转移到基质辅助激光解吸电离源质谱靶板上；(2)液态蛋白样：将靶板温度调节至20-100℃，使液滴体积减小到0-1微升；固态蛋白样品：将靶板温度调节至室温20-35℃；(3)将靶板置于密闭空间，加入蛋白酶溶液及其缓冲液，所加蛋白酶与样品中蛋白的质量比为2∶1-1∶500；调节温度至蛋白酶的反应温度进行酶解，分析测定。
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