[发明专利]从胰渣中提取及纯化胰蛋白酶的方法有效
| 申请号： | 200510030396.5 | 申请日： | 2005-10-11 |
| 公开（公告）号： | CN1948473A | 公开（公告）日： | 2007-04-18 |
| 发明（设计）人： | 吴世斌;曹韫旭;王伟刚;宋惠蓉;杨桦 | 申请（专利权）人： | 江苏万邦生化医药股份有限公司;上海复星医药（集团）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/76 | 分类号： | C12N9/76 |
| 代理公司： | 上海东亚专利商标代理有限公司 | 代理人： | 董梅;孔德力 |
| 地址： | 221002江苏省徐州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明从胰渣中提取及纯化胰蛋白酶的方法涉及酶学、及其分离或纯化方法技术领域。公开了一种从胰渣中提取和纯化胰蛋白酶的方法，以解决现有技术中存在的胰酶激活程序复杂、纯化过程中有机溶剂污染环境的技术缺陷。本发明提取和纯化胰蛋白酶的方法包括用无机酸从胰渣中抽提胰蛋白酶；抽提液调整pH至6.0－8.0，用Ca2+激活；调节上清的pH至3.0－4.0，经阳离子交换层析收集含有胰蛋白酶活性的洗脱液；用亲和层析进一步纯化即得纯化的胰蛋白酶。本发明的收率达1.2g胰蛋白酶/Kg胰渣，比活性大于10000U/mg蛋白质。激活胰酶的操作简单，整个纯化过程中未使用任何有机溶剂因而减少了环境污染。 | ||
| 搜索关键词： | 胰渣中 提取 纯化 胰蛋白酶 方法 | ||
【主权项】：
1.一种从胰渣中提取及纯化胰蛋白酶的方法，包括如下步骤：(a)用无机酸从胰渣中抽提胰蛋白酶；(b)调整含有胰蛋白酶的抽提液的pH至6.0-8.0，Ca2+激活；(c)调节上述(b)中的上清的pH至3.0-4.0，经阳离子交换层析收集含有胰蛋白酶的洗脱液；(d)上述(c)收集的含有胰蛋白酶的洗脱液与对胰蛋白酶有特异性亲和力的介质接触，洗去未结合的蛋白质，用解离胰蛋白酶的洗脱液洗脱结合的胰蛋白酶，收集洗脱液即得纯化的胰蛋白酶。
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