[发明专利]用于精神分裂症诊断的血浆特异性蛋白获取方法及应用

摘要

本发明提供一种用于精神分裂症诊断的血浆特异性蛋白获取方法及应用，利用双向凝胶电泳的方法分离待测个体血浆蛋白质，从双向凝胶电泳图谱上得到α珠蛋白、α1抗胰蛋白酶、α1巨球蛋白、血清淀粉样蛋白P组份、抗纤维蛋白酶III和维生素D结合蛋白的表达量，并将此六个特异性蛋白的表达量作为判断被测个体是否患精神分裂症的参考依据。本发明利用分子标记客观地诊断精神分裂症，而不依赖于医生对诊断对象的主观判断。由于血浆具有取材方便，无创伤性，并可连续检测的优点，因此本发明使诊断具有极大的临床应用的可能。本发明同时可用于评价治疗精神分裂症药物的疗效，指导药物开发。

主权项

1、一种用于精神分裂症诊断的血浆特异性蛋白获取方法，其特征在于包括以下步骤：1)收集待测者的静脉血液样品，经离心分离得到血浆；2)紫外分光光度计测定血浆蛋白浓度；取含0.8mg蛋白的血浆，用样品缓冲液稀释血浆至450ul，样品缓冲液的成份是：7M尿素，2M硫尿，4％CHAPS，60mM二硫苏糖醇，0.5％IPG缓冲液；最后离心得到可进行第一相等电聚焦电泳的样品；3)经离心后的样品通过水化上样的方式上样至24cm、pH4-7非线性干胶条，进行第一相等电聚焦电泳；第一相等电聚焦电泳完成后，将胶条放入含0.02％二硫苏糖醇的胶条平衡液平衡一次；再将胶条放入含0.025％碘乙酰胺的胶条平衡液平衡一次，胶条平衡液的成份是6M尿素，1.5M Tris-Cl，30％甘油和20％十二烷基硫酸钠；平衡后的胶条进行12.5％十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳，得到一张二维电泳凝胶；4)将二维电泳凝胶经固定、染色、脱色三个步骤完成考马斯亮蓝染色，得到一张染色后的二维电泳凝胶；5)用图像扫描仪对染色后的二维电泳凝胶进行扫描，得到一张二维电泳凝胶图谱；6)用二维电泳凝胶图像分析软件分析二维电泳凝胶图谱上α珠蛋白、α1抗胰蛋白酶、α1巨球蛋白、血清淀粉样蛋白P组份、抗纤维蛋白酶III和维生素D结合蛋白的表达量，得到上述可用于精神分裂症诊断的六个血浆特异性蛋白的相对表达量。