[发明专利]一种分离植物细胞壁总蛋白的方法无效
申请号: | 200410101581.4 | 申请日: | 2004-12-23 |
公开(公告)号: | CN1796406A | 公开(公告)日: | 2006-07-05 |
发明(设计)人: | 林金星;陈坤明;王钦丽 | 申请(专利权)人: | 中国科学院植物研究所 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C07K1/36 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100093北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种较快速分离植物细胞壁总蛋白的方法。所述分离植物细胞壁总蛋白的方法,包括以下步骤:1)先后用磷酸缓冲液和Triton X-100溶液洗涤细胞壁材料;2)用氯化钠溶液、氯化钙溶液或乙二胺四乙酸溶液对经洗涤的细胞壁材料进行洗脱,得到洗脱液和沉淀物质,洗脱液经脱盐、浓缩后得到浓缩液A;3)将步骤2)的沉淀物质再用尿素缓冲液进行洗脱、浓缩,得到浓缩液B;4)合并浓缩液A和B,获得含植物细胞壁总蛋白的浓缩液C;5)用冷丙酮沉淀浓缩液C中的蛋白,得到植物细胞壁总蛋白。本发明具有简便快速,分离效果好的特点,用普通的仪器设备及常规试剂即可获得大量具有活性的细胞壁总蛋白,因而可在各类实验室推广使用,具有较大的实际应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 分离 植物 细胞壁 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
1、一种分离植物细胞壁总蛋白的方法,包括以下步骤:1)先后用磷酸缓冲液和Triton X-100溶液洗涤细胞壁材料;2)用氯化钠溶液、氯化钙溶液或乙二胺四乙酸溶液对经洗涤的细胞壁材料进行洗脱,得到洗脱液和沉淀物质,洗脱液经脱盐、浓缩后得到浓缩液A;3)将步骤2)的沉淀物质再用尿素缓冲液进行洗脱、浓缩,得到浓缩液B;4)合并浓缩液A和B,获得含植物细胞壁总蛋白的浓缩液C;5)用冷丙酮沉淀浓缩液C中的蛋白,得到植物细胞壁总蛋白。
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