[发明专利]重组人干扰素α1b的纯化工艺有效
申请号: | 200410050936.1 | 申请日: | 2004-07-28 |
公开(公告)号: | CN1727361A | 公开(公告)日: | 2006-02-01 |
发明(设计)人: | 何询;于德强;张为 | 申请(专利权)人: | 深圳科兴生物工程股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/56 | 分类号: | C07K14/56;C07K1/36 |
代理公司: | 深圳睿智专利事务所 | 代理人: | 陈鸿荫;周惠来 |
地址: | 518057广东省深*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 一种重组人干扰素α1b的纯化工艺,用于从表达人干扰素α1b的工程菌中提取重组人干扰素α1b,包括细菌破碎、扩张床吸附、亲合层析和凝胶过滤步骤。细菌破碎是在Tris-HCl缓冲液中进行;所述扩张床吸附步骤中,选用阴离子凝胶,缓冲体系选用pH值为7.4的Tris-HCl,并选用0.4MNaCl pH7.4 50mM Tris-Hcl洗脱液一步洗脱。所述亲和层析步骤中,选用α1b干扰素的单克隆抗体偶联的凝胶;平衡液采用PBS,清洗液采用PBS,洗脱液采用0.1M Gly-HCl,再生液采用0.1M Tris-HCl及0.1M NaAc-HAc缓冲液。所述凝胶过滤步骤中,选用Sephacryl凝胶,缓冲体系选用PBS。采用本重组人干扰素α1b的纯化工艺,生产效率可以大大提高,生产成本则大大降低。 | ||
搜索关键词: | 重组 干扰素 纯化 工艺 | ||
【主权项】:
1.一种重组人干扰素α1b的纯化工艺,用于从表达人干扰素α1b的工程菌中提取重组人干扰素α1b,包括细菌破碎,以及目标蛋白的捕获、中间纯化和精制过程,其特征在于:所述目标蛋白的捕获过程采用扩张床吸附,中间纯化过程采用亲合层析,精制过程采用凝胶过滤。
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