[发明专利]根农杆菌介导转化草坪草的方法

摘要

本发明公开了一种根农杆菌介导转化草坪草的方法，该方法包括以下步骤：1)以胚为外植体诱导愈伤组织；2)置于愈伤组织状态调整培养基上，使其向胚性愈伤组织发展；3)将愈伤组织浸泡于带有植物表达载体的根农杆菌菌液中；4)将菌液浸泡过的愈伤组织置于共培养培养基上共培养；5)将受体组织置于诱导筛选培养基上进行抗性愈伤组织的诱导；6)将生长的抗性愈伤组织置于分化培养基上使其分化出再生植株。本发明解决了长期以来人们一直期望解决的草坪草转基因育种难的问题，为草坪草的转基因育种搭建了一个可靠实用的平台，具有重要的理论及实践意义。

主权项

1、一种根农杆菌介导转化草坪草的方法，包括以下步骤：1)以胚为外植体诱导愈伤组织；愈伤组织诱导培养基是在MS基本培养基的基础上添加了2，4-二氯苯氧基乙酸；2)当愈伤组织生长20-30天时，将其置于愈伤组织状态调整培养基上，使其向胚性愈伤组织发展；愈伤组织状态调整培养基是在MS基本培养基的基础上添加了2，4-二氯苯氧基乙酸和6-苄氨基嘌呤；3)将愈伤组织浸泡于带有植物表达载体的根农杆菌菌液中；4)将菌液浸泡过的愈伤组织置于共培养培养基上共培养；共培养培养基是在MS基本培养基的基础上添加了2，4-二氯苯氧基乙酸；5)将受体组织置于诱导筛选培养基上进行抗性愈伤组织的诱导；抗性愈伤组织诱导筛选培养基是在MS基本培养基的基础上添加了2，4-二氯苯氧基乙酸和选择性抗生素；6)将生长的抗性愈伤组织置于分化培养基上使其分化出再生植株；分化培养基是在MS基本培养基的基础上添加了细胞6-苄氨基嘌呤和激动素。