[发明专利]肿瘤标志物的电化学免疫测定方法及微体积免疫测定芯片

摘要

肿瘤标志物的芯片电化学免疫测定方法：(1)通过化学修饰将电子传递媒介体固定在环形碳电极内表面，将该媒介体修饰的环形电极的内腔直接作为微反应池。参比电极和对电极置于反应池上方，反应池底部固定的抗原分子功能化膜；(2)当溶液中只存在适量辣根过氧化酶标记肿瘤标志物抗体时，温育后酶标抗体与反应池底部固定的抗原分子功能化膜上的抗原分子发生免疫反应使其连接在反应池底部。(3)当待测抗原溶液中含有HRP标记抗体和时，游离的免疫结合物可接触到反应室内壁固定的电子媒介体，从而可以在工作电极上获得催化H₂O₂氧化的催化电流，该催化电流与溶液中待测抗原含量成正比。本发明公开了相配合的微体积免疫测定芯片。

主权项

1.肿瘤标志物的芯片电化学免疫测定方法：其特征是(1)通过化学修饰将电子传递媒介体固定在环形碳电极内表面，将该媒介体修饰的环形电极的内腔直接作为微反应池。参比电极和对电极置于反应池上方，反应池底部固定的抗原分子功能化膜；(2)当溶液中只存在适量辣根过氧化酶标记肿瘤标志物抗体时，温育后酶标抗体与反应池底部固定的抗原分子功能化膜上的抗原分子发生免疫反应使其连接在反应池底部，此时固定化的辣根过氧化酶HRP无法接触到修饰在反应室内壁的电子媒介体，因此不能催化溶液中H2O2氧化，在工作电极上得不到该催化电流信号；(3)当待测抗原溶液中含有HRP标记抗体和时，竞争免疫反应使部分HRP标记抗体与待测抗原结合形成免疫结合物而游离在溶液里，这部分游离的免疫结合物可接触到反应室内壁固定的电子媒介体，从而可以在工作电极上获得催化H2O2氧化的催化电流，并且该催化电流与溶液中待测抗原含量成正比。(4)通过催化电流的响应值可以直接获得溶液待测抗原的含量。