[发明专利]耐酸诱变浸矿菌种的选育方法

摘要

耐酸诱变浸矿菌种的选育方法包括以下步骤：从矿山酸性矿坑水中取回含有氧化亚铁硫杆菌、氧化亚铁微螺菌等混合菌的带菌水样，进行分离和培养，得到较纯混合菌种；在6－9K无铁培养基中加入所需浸出的矿石粉末，进行驯化、培养，得到驯化混合菌；驯化混合菌用He－Ne激光器进行辐照诱变，获得突变混合菌株；突变菌株在低pH值下进行筛选，活化转接，得到耐低pH值的诱变菌；进行浸矿适应性驯化、培养，获得耐酸诱变浸矿混合细菌，该菌生长周期为24－48小时，将44.43g/L Fe²⁺完全(100％)氧化成为Fe³⁺的氧化时间为9－15小时。本菌种可耐pH0.9－1.5，最佳生长pH值为1.2－1.75，使浸出速度提高，浸出周期缩短1/3－2/3，金属浸出率提高10－30％，降低生产成本10－30％。

主权项

1、耐酸诱变浸矿菌种的选育方法，其特征在于：它包括以下几个步骤：(1)获得原始菌种：从矿山酸性矿坑水中取回含有氧化亚铁硫杆菌、氧化硫硫杆菌和氧化亚铁微螺菌等混合菌的带菌水样，将上述水样以6-9K培养基进行分离和培养，得到以含氧化亚铁硫杆菌为主，菌浓度在108个/ml以上的较纯混合菌种；(2)在6-9K无铁培养基中加入粒度小于76微米占95％的所需浸出的矿石粉末，矿浆浓度为5％-40％递增，细菌接种量为10％，进行驯化、培养，得到以含氧化亚铁硫杆菌为主，菌浓度108-1010个/ml的驯化混合菌；(3)将上述获得的驯化混合菌用He-Ne激光器进行辐照诱变，将激光发生器对准塑料小管，先预热至少30min，随后小管内加入(2)中培养24-72小时的驯化混合菌液，光束从侧面照射菌液，λ＝633nm，扩束光斑直径1.0cm，照射距离30-50cm，辐照时间5-20min，诱变后将小管在黑暗环境中放置至少4小时后转接入装有10ml pH＝1.8的含有Cu2+离子或Zn2+离子或Cu2+离子、Zn2+离子、Co2+离子的6-9K培养基中，30℃的摇床培养，摇床速度50-250转/分钟，获得突变混合菌株；(4)突变混合菌株在低pH值下进行筛选，5-8次连续活化转接，得到耐低pH值的诱变菌；(5)将获得的耐低pH值的诱变菌在对应的pH值且含有Cu2+离子或Zn2+离子或Cu2+离子、Zn2+离子、Co2+离子的培养基中培养48小时的菌液，按10％接种量接入对应的pH值需要进行细菌浸出的矿浆中于30℃的摇床中进行浸矿适应性驯化、培养，过程需进行5-8次后，即获得耐酸诱变浸矿细菌，该菌生长周期为24-48小时，将44.43g/LFe2+完全(100％)氧化成为Fe3+的氧化时间为9-15小时。