[发明专利]一种双歧杆菌、乳酸杆菌混合活菌滴剂制备方法

摘要

一种双歧杆菌、乳酸杆菌混合活菌滴剂制备方法，其特征在于它是从年轻健康妇女阴道穹隆处分离并鉴定出双歧杆菌、乳酸杆菌各一株，经体外诱变培养、耐氧驯化再加入分散剂冷冻后制成。以PYG厌氧菌增菌培养基使上述菌种增菌达到浓度10⁹～10¹¹CFU/ml以上，取上述浓度菌液10～30％，加10～30％脱脂牛乳、5～15％蔗糖分散剂、10～40％明胶、40～70％甘油赋形剂充分混合，上述各组分之和为100％，然后于-80℃低温冰箱30～60分钟冻结，22～26小时内-30℃～-70℃冷冻干燥，再将两株菌粉1∶1混合，使每颗药丸含双歧杆菌、乳酸杆菌活菌各0.4～0.6亿。本发明菌株生物性状稳定、无耐药质料存在、耐氧性增强、协同搞炎、抗感染，抑菌谱扩大，且具有抗肿瘤及免疫调节作用，适合工业生产。

主权项

1、一种双歧杆菌、乳酸杆菌混合活菌滴剂制备方法，其特征在于它是从23～27岁健康已婚未育、无阴道炎妇女阴道穹隆处提取0.1～0.3ml分泌物后分别以PH为6.8～7.2之双歧杆菌选择性培养基和PH为5.8～6.2之乳酸杆菌选择性培养基之液体培养基倍比稀释，取稀释度10-5～10-7分泌物稀释液以铂耳环划线分别接种于双歧杆菌选择性培养基和乳酸杆菌选择性培养基平皿，厌氧培养24～72小时，挑单克隆于各自选择性培养基进一步选择培养后并鉴定出双歧杆菌、乳酸杆菌各一株，其中阴道双歧杆菌生化鉴定编码为47757732，阴道乳酸杆菌编码为44346222，将上述菌于体外5代或5代以上反复传代培养，然后在氧浓度5～15％环境下进行细菌培养，加入分散剂冷冻干燥后，再以PYG厌氧菌增菌培养基使上述菌种增菌达到浓度109～1011CFU/ml以上，取上述浓度菌液10～30％，加10～30％脱脂牛乳、5～15％蔗糖分散剂、10～40％明胶、40～70％甘油赋形剂，充分混合，上述各组分之和为100％，然后于-80℃低温冰箱30～60分钟冻结，22～26小时内-30℃～-70℃冷冻干燥，再将两种菌粉1∶1混合，使每颗药丸含双歧杆菌、乳酸杆菌活菌各0.4～0.6亿。