[发明专利]衬底介导的膜蛋白在脂双层中的重组方法无效
| 申请号： | 01126362.8 | 申请日： | 2001-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN1157411C | 公开（公告）日： | 2004-07-14 |
| 发明（设计）人： | 魏青青;胡晓芳;孙洁林;朱培闳;胡钧;李民乾 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海原子核研究所;中国科学院上海生理研究所;上海交通大学 |
| 主分类号： | C07K17/02 | 分类号： | C07K17/02;C07K14/435;C07K14/195;C07K1/14 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人： | 肖剑南 |
| 地址： | 201800上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种衬底介导的膜蛋白在脂双层中的重组方法，该方法将膜蛋白经纯化后与磷脂混合，然后将该溶液滴于衬底表面，液滴中的蛋白和磷脂同时吸附在衬底表面，磷脂在衬底表面自发形成脂双层并迅速铺展，将蛋白镶嵌其中，用缓冲液冲洗表面，洗去吸附不牢固的蛋白和磷脂，在衬底表面即为重组了蛋白的脂双层。本发明的方法步骤简单，方便快速，能够形成有支撑的脂双层，适用于各种膜蛋白，特别适用于结构复杂、易于水解的膜蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 衬底 膜蛋白 双层 中的 重组 方法 | ||
【主权项】：
1.一种衬底介导的膜蛋白在脂双层中的重组方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)将纯化后的膜蛋白与磷脂混合，该溶液中蛋白和磷脂的摩尔比为1∶102～1∶107；(2)将该溶液滴于云母衬底表面，于温度15～40℃的条件下，在孵育槽中孵育，液滴中的蛋白和磷脂同时吸附在云母衬底表面，然后用缓冲液冲洗表面，洗去吸附不牢固的蛋白和磷脂，在云母衬底表面即为重组了蛋白的脂双层。
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