[发明专利]一种用于以微波为媒介的酶联免疫吸附测定的速测法

摘要

本发明涉及一种用于进行以微波为媒介的酶联免疫吸附测定(MELISA)的快速而有效的方法，用于检测微量的生物分子，例如抗原、抗体等。本发明尤其涉及一种以微波为媒介将抗原和抗体固定在活化后的表面上，随后采用可控的微波辐射进行随后的ELISA步骤。本发明的工艺能够将ELISA所需的总时间从数小时到几天显著地降低到不到10分钟。本发明的ELISA工艺具有快速、经济、再现、简单的优点，并具有自动化的潜力。其在临床诊断、分子生物、农业、食品工艺、环境科学、生物医学研究以及其他相关领域进行ELISA方面非常有用。

主权项

1.一种用于以微波为媒介的酶联免疫吸附测定的速测法，其特征在于采用了一种活化后的载体，其中所述的方法包括：(a)提供一种活化后的载体；(b)通过将一种选自于一种抗原或抗体中的生物分子溶解在一种涂敷缓冲液而将所述的生物分子装载在所述载体的活化后的孔眼中，并将所述孔眼置于一微波炉中，随后采用频率范围为2300-2500MHz输出功率为600-900瓦的微波对所述孔眼辐射50-100秒，之后采用适当的冲洗缓冲液对该孔眼进行全面地冲洗；(c)通过将封堵液加载到所述孔眼中而采用如上述步骤(b)所获得的一种固定生物分子将孔眼的自由位置封堵住，并在频率范围为2300-2500MHz输出功率为600-800瓦的微波炉中对其辐射5-20秒，并采用适当的冲洗缓冲液对该孔眼进行冲洗；(d)将溶解在一种缓冲液中的相应的抗体或抗原装载在固定有如上述步骤(c)所获得的抗原或抗体的孔眼中，随后在2300-2500MHz输出功率为50-200瓦的微波炉中对所述孔眼辐射90-200秒，之后采用冲洗缓冲液进行冲洗；(e)将溶解在一种适当的缓冲液中的一种适当的酶结合体由上述步骤(d)所获得的上述孔眼中，并在一种频率2300-2500MHz输出功率为100-300瓦的微波炉中对所述孔眼辐射50-150秒，随后采用冲洗缓冲液进行冲洗；(f)将一基质染色缓冲液添加到如上述步骤(e)所获得的上述孔眼中并将其置于暗处大约4-10分钟，随后添加阻化剂(stopsolution)，并通过分光光度计以一种适当的波长测量溶液的光密度(optical density)。