[发明专利]海水鱼二联弧菌灭活疫苗的制备方法

摘要

本发明涉及一种海水鱼二联弧菌灭活疫苗的制备方法。它是从病鱼体内分离出鳗弧菌和付溶血弧菌并在一定条件下进行分别培养,再以生物反应器扩大培养并进行灭活处理、等量混合后得到相应的二联灭活疫苗。现场可进行投喂或浸泡免疫,其制作和投予方便安全且免疫效果好,能有效防治鱼类的皮肤溃疡、眼球混浊及由该二种病原引起的其它疾病。可广泛用于海水鱼养殖中。

主权项

1、海水鱼二联弧菌灭活疫苗的制备方法是(1)将从病鱼体内分离的鳗弧菌和付溶血弧菌，分别接种到2216-E固体培养基斜面上，并在28±0.2℃下培养3-4天；(2)然后将高压灭菌后的2216-E液体培养基注入无菌的生物反应器中，鳗弧菌和付溶血弧菌分别培养，反应温度保持30±0.2℃，搅拌速度为600rpm，通气量为4L/min，培养24小时左右，反应器内溶氧趋于平衡时，菌体量达到高峰，停止反应；(3)取出菌液，加入0.5％(v/v)福尔马林液，静置24小时；(4)静置后，以4000rpm离心15分钟，分别收集沉积的、得到灭活后的付溶血弧菌和鳗弧菌；(5)将两种灭活的菌体按1∶1比例混合制成二联弧菌灭活疫苗。