[发明专利]简便分离血清高密度脂蛋白及其亚组分试剂盒的制备方法有效
申请号: | 00107298.6 | 申请日: | 2000-05-09 |
公开(公告)号: | CN1164613C | 公开(公告)日: | 2004-09-01 |
发明(设计)人: | 庄茅 | 申请(专利权)人: | 庄茅 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C07K14/76;C07K1/30;C08B37/02 |
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地址: | 10083*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 简便分离血清高密度脂蛋白及其亚组分试剂盒的制备方法是将<10℃的甲酰胺溶液放入冰水中搅拌,滴入氯磺酸溶液逐升温至50-52℃加分子量为25000氢化右旋糖酐控温搅拌至达到取样测定反应物粘度后,冷却至30℃再先后加98%乙醇沉淀两次,加蒸馏水调pH值搅拌,经阳离子交换树脂柱过滤,调pH沉淀得右旋糖酐硫酸酯,此物再分别与氯化镁,05M Tris-HCL缓冲剂组成高密度脂蛋白及其亚组分的沉淀剂I、II的试剂盒,为冠心病与脂蛋白研究提供一种快速可靠的新方法。 | ||
搜索关键词: | 简便 分离 血清 高密度 脂蛋白 及其 组分 试剂盒 制备 方法 | ||
【主权项】:
简便分离血清高密度脂蛋白及其亚组分试剂盒的制备方法。 其特征在于:分两大步制作: 一、先简便快速合成特定低分子量右旋糖酐硫酸酯,其方法为: 1、取2000毫升圆底三口烧瓶置于冰水浴中,加入525毫升甲酰胺溶液, 并不断搅拌使溶液温度低至10℃以下: 2、在维持内温在15℃以下的情况滴加125毫升氯磺酸:至滴完; 3、逐渐升温至50-52℃,之后加干燥的分子量为25,000的氢化右 旋糖酐50克,并不断搅拌和控制内温在50-52℃之间,一小时后 取样测定反应物的粘度当比粘度在0.65±0.05范围时应中止反应; 4、冷却至30℃以下时加入1000毫升98%以上的乙醇进行沉淀,放置半 小时后,倾去上清液,再将沉淀物溶解于300毫升蒸馏水中,再加800 毫升98%乙醇沉淀一次,之后将沉淀物溶解于250毫升蒸馏水中,并 调节PH至9搅拌1小时,再将溶液通过阳离子交换树脂柱以除去杂 质之后过滤将滤液的PH调至7,即可沉淀干燥成白色粉状的右旋糖 酐硫酸酯;
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