本发明提供了一种靶向敲减小鼠肝脏Atf6α基因表达的重组8型腺相关病毒(rAAV8)‑Atf6α shRNA构建及其应用,属于肝脏疾病治疗研究技术领域,本发明中,所述shRNA靶向的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,所述shRNA的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;所述靶向敲减小鼠肝脏Atf6α基因表达的重组载体,包括骨架载体pAAV8和所述shRNA。本发明所述靶向敲减Atf6α基因表达的shRNA能够敲减Atf6α基因表达,能够应用于肝内内质网应激相关的小鼠模型研究中,有利于进一步了解Atf6α基因表达在肝损伤中的作用;从而为临床防治肝脏疾病提供新思路和靶点。