本申请涉及生物大分子分离纯化技术领域，具体而言，涉及一种亲和层析填料及其制备方法以及亲和纯化工艺。亲和层析填料包括活化后的载体以及连接于活化后的载体上的配体。本申请提供的亲和层析填料通过将含有锁核酸结构以及氨基基团的配体连接至活化后的载体上，可以有效对目的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ IDNO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.7所示的突变的T7RNA聚合酶进行分离纯化，有效提高纯化后的目的蛋白的收率以及纯度。
本申请涉及基因工程技术领域，具体而言，涉及一种转录反应液、锁核酸修饰的RNA的制备方法以及突变的T7RNA聚合酶的应用。用于制备锁核酸修饰的RNA的转录反应液，包括DNA模板、突变的T7RNA聚合酶、LNA‑NTPs以及缓冲液；其中，突变的T7RNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.7所示。本申请通过将上述突变的T7RNA聚合酶加入转录反应液中以用于合成锁核酸修饰的RNA时，可以显著提高锁核酸修饰的RNA的转录产率，操作简单，利于工业化生产。
