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[发明专利]一种羊膜间充质干细胞的培养及冻存方法-CN202010022849.4有效
发明人：李哲浩 -专利权人： 赛瑞诺（北京）生物科技有限公司
申请日： 2020-01-09 - 公布日： 2022-05-10 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种羊膜间充质干细胞的培养及冻存方法，所述培养方法包括羊膜组织分离、羊膜间充质干细胞分离、P0代羊膜间充质干细胞培养以及扩增培养。本发明所述羊膜间充质干细胞的培养方法，在羊膜间充质干细胞分离阶段，通过采用特殊的混合酶消化液体系(消化液中各组分终浓度：1.5‑2U/mL中性蛋白酶、0.5mg/mL脱氧核糖核酸酶I以及1mg/mL胶原酶IV)进行消化，能够更为有效的从羊膜组织中分离羊膜间充质干细胞，进而显著提高P0代细胞得率，本发明采用一步消化法，相对传统的两步消化，操作更便捷，培养得到的羊膜间充质干细胞活性好，得率高、纯度高，重复性好。
一种羊膜间充质干细胞培养方法

[实用新型]一种用于获取胎盘组织干细胞的过滤装置-CN201921011951.3有效
发明人：李哲浩 -专利权人： 赛瑞诺（北京）生物科技有限公司
申请日： 2019-07-01 - 公布日： 2020-05-19 - 主分类号： C12M1/12 文献下载
摘要：本申请公开了一种用于获取胎盘组织干细胞的过滤装置，包括收集缸和过滤件，收集缸呈一端设有开口的筒状结构，过滤件支撑在收集缸的内部，用于将收集缸内部的容纳空间分隔为两个分别用于容纳胎盘干细胞和剩余组织的空腔。将胎盘组织放置在收集缸内位于过滤件的上方，胎盘干细胞会通过过滤件落入至过滤件的下方，剩余组织则留在过滤件的上方，从而得到胎盘干细胞。该装置还包括设置在收集缸与过滤件上方的盖体，在过滤过程中，将盖体盖在收集缸和过滤件的上方，用于遮盖胎盘干细胞和剩余组织。如此设置，在对胎盘组织干细胞进行过滤的过程中，保证胎盘干细胞和剩余组织与外界环境隔离，可以避免外界杂物及细菌的进入，有效避免胎盘干细胞受到污染。
一种用于获取胎盘组织干细胞过滤装置

[实用新型]一种用于新生儿脐带组织的收集装置-CN201921011914.2有效
发明人：李哲浩 -专利权人： 赛瑞诺（北京）生物科技有限公司
申请日： 2019-07-01 - 公布日： 2020-04-21 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本申请公开了一种用于新生儿脐带组织的收集装置，包括收集盒和第一蓄冷件，其中收集盒包括盒体和可与盒体密封扣合在一起的盖体，盒体内部具有用于容纳脐带组织保护液和脐带组织的容纳空腔，脐带组织保护液由生理盐水、细胞培养液及一定浓度的抗生素组成，用于维持脐带组织的生物活性。盖体内部设置有一定的容纳空间，用于容纳第一蓄冷件。如此设置，将脐带组织收集在盒体内部后，将盖体与盒体密封扣合在一起，使盒体内部的容纳空腔与外界环境隔离，避免细菌的侵入；位于盖体内部的第一蓄冷件可以对盒体内部提供冷源，为脐带组织提供低温环境，有利于保证其生物活性及新鲜度。
一种用于新生儿脐带组织收集装置

[发明专利]一种人自体脂肪间充质干细胞的无血清培养方法-CN201911271557.8在审
发明人：李哲浩 -专利权人： 赛瑞诺（北京）生物科技有限公司
申请日： 2019-12-12 - 公布日： 2020-02-28 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种人自体脂肪间充质干细胞的无血清培养方法，具体为选取无菌脂肪组织进行第一次消化，获取第一细胞悬液；对未消化脂肪组织进行第二次消化，获得第二细胞悬液；将第一细胞悬液和第二细胞悬液合并后进行培养、传代、鉴定，得到所述人自体脂肪间充质干细胞。本发明发明的脂肪间充质干细胞培养方法中原代细胞的分离、扩增培养和冻存体系均为无血清培养基，完全避免了动物源成分添加的风险；本发明所述方法采用两步酶消化法，利用消化酶与脂肪组织的特定比例，使脂肪组织充分接触酶溶液，使得脂肪组织得到充分消化，且不会使细胞受损，原代细胞的得率高、活性好、重复性高、安全性好，符合临床应用标准。
一种脂肪间充质干细胞血清培养方法

[发明专利]一种人源脐带间充质干细胞的培养及冻存方法-CN201910612981.8在审
发明人：李哲浩 -专利权人： 赛瑞诺（北京）生物科技有限公司
申请日： 2019-07-09 - 公布日： 2019-09-27 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种人源脐带间充质干细胞的培养和冻存方法，所述培养方法包括先从脐带组织中分离培养原代种子细胞，然后将原代种子细胞进行扩大培养的步骤，本发明通过在原代种子细胞培养阶段，创造性的采用第二次原代贴壁培养的方法，大幅缩短了原代种子细胞分离培养时间，提高了原代种子细胞数量，提高了原代种子细胞纯度，为临床研究和应用提供了充足的标准化种子细胞和培养方法。本发明制备得到的人源脐带间充质干细胞，在体、内外均可以向成骨、成软骨、成脂分化。本发明所述冻存方法通过采用无血清冻存液冻存体系，保证了所冻存细胞无动物源成分，且不使细胞受损，复苏后细胞活性好。
种子细胞冻存脐带间充质干细胞人源分离培养种子细胞培养细胞扩大培养临床研究脐带组织贴壁培养细胞活性应用提供动物源冻存液无血清软骨成骨制备标准化分化复苏受损保证