本发明涉及一种定量细胞端粒酶活性的方法和试剂盒。所述方法包括对待测样品的细胞裂解物进行利用在5’端标记FAM-iso-dC的引物(如SEQ ID NO:1)进行端粒酶的延伸反应和利用Dabcyl-iso-dGTP进行荧光淬灭的PCR反应(如利用引物对SEQ ID NO:1和2,或SEQ ID NO:1和3)。检测结果显示,该方法可以得到端粒酶活性和细胞数之间的完美线性关系。使用本发明的技术,可以检测出正常细胞中混有的低至1/1000的癌细胞的端粒酶,也可以检测复杂样品比如尿液样品中的癌细胞的端粒酶。