本发明属于软体动物亚型血淋巴细胞的新型膜表面标记分子的鉴定及应用,涉及一种长牡蛎分化抗原蛋白CgCD9及其单克隆抗体的制备和应用。长牡蛎分化抗原蛋白CgCD9的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。所述长牡蛎分化抗原蛋白CgCD9在作为长牡蛎无粒细胞膜表面标记分子中的应用。本发明首次在长牡蛎中克隆获得CgCD9分子,其包含典型的四次跨膜结构域,对其表达特征分析发现,CgCD9mRNA在长牡蛎无粒细胞的表达量显著高于半粒细胞和颗粒细胞,其主要位于无粒细胞的细胞膜上。利用本发明制备的CgCD9单克隆抗体结合免疫磁珠法可高纯度地分离有活力的无粒细胞,为无粒细胞的体外培养及对无粒细胞的发育过程和免疫学功能的深入研究提供了有力的工具。
本发明公开一种用于分选长牡蛎颗粒细胞的AATase单克隆抗体及制备方法,所述AATase单克隆抗体是由稳定分泌AATase抗体的杂交瘤细胞株免疫小鼠,得小鼠腹水经纯化而成;所述杂交瘤细胞株按如下方法制备:以氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的重组蛋白免疫小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合后接种于HAT选择培养基中,形成杂交瘤细胞株;采用间接ELISA法筛选出阳性细胞株;用有限稀释法筛选出能稳定分泌AATase抗体的杂交瘤细胞株。