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[发明专利]一种罗汉果高效组培快繁方法-CN202110874404.3有效
发明人： 莫雪燕;周怡静;李元元;张玉华;刘彦雪 -专利权人：桂林莱茵生物科技股份有限公司
申请日： 2021-07-30 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了罗汉果高效组培快繁方法，取罗汉果组培苗的茎段或顶芽作为外植体，接种至培养基中培养；所述培养基中含有0.01‑0.1ppm的油菜素内酯。本发明能够高效诱导罗汉果组培苗的增殖，分化更多的丛生芽，提高罗汉果组培苗繁殖系数，缩短获得罗汉果组培苗的时间，降低了生产成本。
一种罗汉果高效组培快繁方法

[发明专利]一种简单安全快速的罗汉果组培外植体入瓶方法-CN202110871797.2在审
发明人：张玉华;莫雪燕;李元元;周怡静;黄荣明;刘彦雪 -专利权人：桂林莱茵生物科技股份有限公司
申请日： 2021-07-30 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了罗汉果组培外植体入瓶方法，取罗汉果的茎段，表面清洁后浸泡于70％以上的酒精中进行表面消毒，剥取0.5‑2毫米茎尖，接种至培养基中，即完成罗汉果组培外植体入瓶。在消毒处理中，避免使用剧毒化学品升汞，对操作人员和环境都非常安全，操作简单，而且消毒效果好，成株率高，解决了野外采集罗汉果枝条材料的组培入瓶的微生物污染问题。
一种简单安全快速罗汉果组培外植体入瓶方法

[发明专利]罗汉果种苗茎尖微嫁接培养方法-CN202110871798.7在审
发明人：张玉华;莫雪燕;李元元;周怡静;黄荣明;刘月;黄雪妹;刘彦雪 -专利权人：桂林莱茵生物科技股份有限公司
申请日： 2021-07-30 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： A01G2/30 文献下载
摘要：本发明公开了罗汉果种苗茎尖微嫁接培养方法，以无毒罗汉果组培苗茎段作为砧木，以带毒组培苗等于小于0.5mm的茎尖为接穗，嫁接于所述砧木，培养至成幼苗。本发明通过把罗汉果等于小于0.5毫米离体茎尖在组培阶段嫁接到无毒组培苗砧木上培养生长，建立了茎尖微嫁接培养技术，在确保茎尖培养脱毒效率的同时，大大缩短了获得再生脱毒种苗的时间。
罗汉果种苗茎尖微嫁接培养方法

[发明专利]一种提高罗汉果甜甙V含量的方法-CN201910776404.2有效
发明人：张玉华;兰玉;莫雪燕 -专利权人：桂林莱茵生物科技股份有限公司
申请日： 2019-08-22 - 公布日： 2022-04-05 - 主分类号： A01G7/06 文献下载
摘要：一种提高罗汉果甜甙V含量的方法，所述的方法在采摘前使用诱导剂处理罗汉果果实，所述的诱导剂为海藻糖、茉莉酸甲酯或蔗糖、茉莉酸甲酯。本发明通过罗汉果甜甙V诱导剂直接作用于罗汉果幼小果实，能够促进罗汉果醇及其低糖基化甜甙的生成，以及向甜甙V的转化和积累，提升诱导剂的作用效率，处理后的罗汉果甜甙含量超过对照的50～100％；同时本发明无需对环境要求严格的组培苗及其他生长发育间段的植株进行处理，同时减少果实处理的频率，处理方法简单有效，适合工业化生产。
一种提高罗汉果含量方法

[发明专利]一种提高罗汉果种苗脱毒效率的方法-CN201910776403.8有效
发明人：张玉华;莫雪燕;兰玉 -专利权人：桂林莱茵生物科技股份有限公司
申请日： 2019-08-22 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：一种提高罗汉果种苗脱毒效率的方法，所述的方法包括：步骤一，配制含病毒抑制剂罗汉果种苗快繁培养基；步骤二，将罗汉果种苗转入步骤一所述的培养基中25～30℃继代培养；步骤三，将步骤二的罗汉果种苗于35～39℃培养，切取种苗的茎尖；步骤四，将步骤三的罗汉果种苗茎尖接种到常规快繁培养基培养30～45天，获得脱毒罗汉果植株；其中，所述病毒抑制剂培养基至少包含以下的一种：病毒唑10～60ppm，吗啉胍100～500ppm，达菲20～100ppm。本发明联合使用病毒抑制剂、茎尖脱毒法，对罗汉果种苗进行二次脱毒，显著提高了罗汉果种苗的脱毒效率。同时，本发明脱毒培养方法简单、简化了操作程序，生产成本低，适合工业化生产。
一种提高罗汉果种苗脱毒效率方法

[发明专利]一种快速检测罗汉果番木瓜环斑病毒的方法-CN201910776448.5在审
发明人：张玉华;兰玉;莫雪燕 -专利权人：桂林莱茵生物科技股份有限公司
申请日： 2019-08-22 - 公布日： 2019-12-13 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：一种快速检测罗汉果番木瓜环斑病毒的方法，所述方法包括：1)检测引物的设计，2)待测罗汉果总RNA提取，3)第一链cDNA合成，4)采用特异引物对进行PCR扩增，5)检测扩增产物目标片段的长度判断是否感染番木瓜环斑病毒。本发明在罗汉果番木瓜环斑病毒最保守区域设计特异性引物对，避开某些变异株的变异区，预期产物特异性强、敏感性高、重复性好、假阳性机率低；同时，相对于传统的ELISA法及cDNA分子探针法，本发明检测成本低、检测周期短，可实现幼苗期罗汉果番木瓜环斑病毒的快速检测。
罗汉果番木瓜环斑病毒快速检测检测扩增产物第一链cDNA 特异性引物总RNA提取保守区域长度判断检测引物目标片段特异性强特异引物预期产物变异区变异株传统的假阳性探针法幼苗期检测避开合成感染

[发明专利]一种快速检测罗汉果小西葫芦黄化花叶病毒的方法-CN201910807172.2在审
发明人：张玉华;兰玉;莫雪燕 -专利权人：桂林莱茵生物科技股份有限公司
申请日： 2019-08-29 - 公布日： 2019-12-10 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：一种快速检测罗汉果小西葫芦黄化花叶病毒的方法，所述方法包括：1)检测引物的设计；2)提取待测罗汉果的总RNA；3)合成第一链cDNA；4)采用特异引物对进行PCR得到扩增产物；5)根据扩增产物目标片段的长度判断是否感染小西葫芦黄化花叶病毒。本发明在罗汉果小西葫芦黄化花叶病毒最保守区域设计了不同以往的新引物对，避开某些变异株的变异区，预期产物特异性强、敏感性高、重复性好，假阳性、假阴性几率为零。用于监控罗汉果种植区小西葫芦黄化花叶病毒传布的早期风险，适用于各个时期罗汉果小西葫芦黄化花叶病毒的快速检测。
罗汉果花叶病毒西葫芦黄化快速检测扩增产物第一链cDNA 保守区域长度判断检测引物目标片段特异性强特异引物预期产物变异区变异株假阳性假阴性种植区总RNA 引物避开合成感染监控

[发明专利]一种增强罗汉果脱毒种苗抗性的方法-CN201910776409.5在审
发明人：张玉华;黄荣明;莫雪燕 -专利权人：桂林莱茵生物科技股份有限公司
申请日： 2019-08-22 - 公布日： 2019-11-15 - 主分类号： A01G7/06 文献下载
摘要：一种增强罗汉果脱毒种苗抗性的方法，所述的方法在罗汉果脱毒种苗培育阶段采用氨基丁酸处理，所述的处理方式为用含有氨基丁酸的培养基培养幼苗或用氨基丁酸对幼苗进行灌根处理。本发明通过采用氨基丁酸抗性增强剂处理幼苗阶段的罗汉果种苗，激发罗汉果自身免疫功能，增强罗汉果植株的抗病抗虫能力，避免或减少罗汉果大田栽培期间的病虫害防治措施，降低农资和劳动力成本，降低罗汉果产品农残风险。
罗汉果氨基丁酸脱毒种苗幼苗病虫害防治措施氨基抗性增强剂劳动力成本罗汉果种苗培养基培养处理方式大田栽培抗虫能力幼苗阶段自身免疫植株酸处理抗性灌根农残抗病激发培育

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