本发明公开了一种加拿大棘球蚴EC95蛋白的制备及应用；所述重组蛋白包括dEC95氨基酸序列；所述dEC95氨基酸序列为加拿大棘球绦虫的EC95删去N端的信号肽区域及C端的跨膜区，得到的修饰后的氨基酸序列；所述EC95基因序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明针对加拿大棘球蚴中的EC95进行修饰，并制备重组表达质粒、重组大肠杆菌工程菌；用这种重组大肠杆菌工程菌表达的融合蛋白具有纯度高、可溶性好、纯化方便、生物学活性高等优点。
本发明公开了一种细粒棘球蚴及加拿大棘球蚴二联亚单位疫苗及其制备方法；该二联亚单位疫苗包含免疫原dEG95/dEC95抗原蛋白和药学上可以接受的载体；其中，dEG95蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；dEC95蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。目前尚无同时抗细粒棘球蚴感染和加拿大棘球蚴感染的疫苗，本发明采用dEG95‑dEC95异源二聚体蛋白作为抗原，制备的抗细粒棘球蚴及加拿大棘球蚴二联亚单位疫苗生产成本低，生产工艺简单；可以同时预防细粒棘球蚴及加拿大棘球蚴的感染，具有安全、高效、成本低、抗原纯度高等诸多优点。
本发明公开了一种细粒棘球蚴及加拿大棘球蚴EG95/EC95蛋白组合的制备及应用；所述重组蛋白组合包括dEG95和dEC95氨基酸序列；dEG95氨基酸序列为狭义细粒棘球绦虫的EG95删去N端的信号肽区域及C端的跨膜区，得到的修饰后的氨基酸序列；EG95基因序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；dEC95氨基酸序列为加拿大棘球绦虫的EC95删去N端的信号肽区域及C端的跨膜区，得到的修饰后的氨基酸序列；EC95基因序列如SEQ ID NO.4所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。本发明的方法具备蛋白表达量高、工艺简单、生产成本低等优点。
本发明公开了一种抗加拿大棘球蚴感染的亚单位疫苗及其制备方法；包含免疫原的EC95抗原蛋白和药学上可以接受的载体；其中，dEC95蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1或其简并序列所示。目前尚无抗加拿大棘球蚴感染的疫苗，本发明采用2dEC95蛋白作为抗原，制备的抗加拿大棘球蚴感染的亚单位疫苗生产成本低，生产工艺简单，具有安全、高效、成本低等诸多优点；即使当抗加拿大棘球蚴亚单位疫苗中dEC95蛋白抗原含量仅为40μg/ml，二次免疫后第4周也能达到1:128以上的抗体效价，且能维持长时期的高滴度的抗体效价。
