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[发明专利]一种建立农杆菌介导观音莲高效转染体系的方法-CN201610505628.6有效
发明人：陈海涛;生承晔;张业胜;董扬 -专利权人：云南纳博生物科技有限公司
申请日： 2016-06-30 - 公布日： 2019-12-13 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开一种建立农杆菌介导观音莲高效转染体系的方法，所述方法包括以下步骤：侵染和共培养阶段：将观音莲无菌苗叶片块放入三角瓶中，倒入农杆菌菌液，三角瓶口密封进行侵染，侵染后倒去菌液，将叶片晾干，转接到共培养培养基中进行暗培养得到愈伤组织；筛选阶段：将共培养获得的愈伤组织转接到筛选培养基中进行两次筛选得到幼芽；抗性苗培养阶段：将获得的幼芽转接到抗性苗培养基培养得到抗性苗；阳性苗检测阶段。本发明使用农杆菌介导观音莲转化，打通观音莲农杆菌介导高效转染体系，这是通过农杆菌转染体系培育新型观音莲最为重要的一步。本发明能够突破观音莲自身遗传屏障，获得难以通过传统育种方式生产的新品种。
一种建立杆菌观音高效转染体系方法

[发明专利]一种自发光烟草及转基因方法-CN201710120673.4在审
发明人：段康;张晨;赵娟;生承晔;张业胜;王文;董扬 -专利权人：云南纳博生物科技有限公司
申请日： 2017-03-02 - 公布日： 2018-09-14 - 主分类号： A01H5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种自发光烟草及转基因方法。所述自发光烟草通过发光基因与质粒载体构建发光基因‑质体载体表达载体，发光基因‑质体载体表达载体通过质体转基因技术导入到烟草叶片中，烟草叶片通过组织培养得到。所述质粒载体为p‑DK6质粒载体，碱基序列如SEQ ID NO.1所示；所述发光基因为LUX基因。本发明采用质体转基因技术得到自发光烟草，该方法依赖于外源基因与叶绿体基因的同源重组，具有定点整合外源基因并使之稳定遗传，环境安全性好，基因产物区域化，表达量极高等优点而受到科学家的青睐。
自发光质体发光基因烟草转基因技术外源基因烟草叶片载体表达质粒载体转基因质粒载体构建环境安全性叶绿体基因定点整合基因产物碱基序列同源重组稳定遗传组织培养表达量区域化发光

[发明专利]一种建立农杆菌介导的宽叶不死鸟转染体系的方法-CN201610496707.5有效
发明人： 生承晔;颜笑洒;张业胜;董扬 -专利权人：云南纳博生物科技有限公司
申请日： 2016-06-29 - 公布日： 2018-08-17 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种建立农杆菌介导的宽叶不死鸟转染体系的方法。所述方法包括以下步骤：步骤(1)组织培养得到宽叶不死鸟幼苗；步骤(2)侵染和共培养；步骤(3)筛选和分离抗性苗共培养结束后，将叶片转接到筛选培养基上进行筛选培养；步骤(4)验证提取获得的抗性苗的叶片的DNA，进行PCR扩增，将PCR产物进行凝胶电泳验证。本发明建立了稳定的宽叶不死鸟的转基因体系，为宽叶不死鸟的转基因育种提供了关键的技术支持，能够培育出具有高观赏价值的宽叶不死鸟新品种。本发明提供的农杆菌介导高效转染体系适合对宽叶不死鸟进行转基因功能验证、宽叶不死鸟突变体的获得、宽叶不死鸟转基因育种。
一种建立杆菌不死转染体系方法

[发明专利]一种建立康乃馨农杆菌介导高效转染体系的方法-CN201610705782.8在审
发明人：颜笑洒;生承晔;张业胜;董扬 -专利权人：云南纳博生物科技有限公司
申请日： 2016-08-23 - 公布日： 2018-03-09 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种建立康乃馨农杆菌介导高效转染体系的方法，所述方法包括以下步骤步骤(1)种子萌发无菌苗阶段；步骤(2)无菌苗扩繁阶段；步骤(3)农杆菌培养阶段；步骤(4)侵染和共培养阶段；步骤(5)筛选阶段；步骤(6)生根阶段和步骤(7)阳性检测阶段。本发明顺利建立了康乃馨农杆菌介导高效转染体系，为进一步利用转基因技术培育康乃馨新品种作出了充分准备，进而可以获得传统育种方式无法培育的新品种；在本发明提供的方法中，愈伤组织诱导率高，保存效果好，为遗传转化提供良好受体；转化效率高，适合大规模工业生产和商业育种。
一种建立康乃馨杆菌高效转染体系方法