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[发明专利]一种重组杆状病毒及其构建方法和应用-CN202310050168.2在审
发明人：付月君;王欢;王伟;王软林;宋莉 -专利权人：山西大学
申请日： 2023-02-01 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组杆状病毒及其构建方法和应用，所述重组杆状病毒为将gp64TM double‑egfp基因通过转座重组整合到杆状病毒－苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒AcMNPV(Autographa californica nucleopolyhedrovirus)的基因组上获得的。本发明还提供了重组杆状病毒的构建方法，包括从AcMNPV基因组获得gp64基因，并对gp64基因中编码跨膜结构域(transmembrane domain,TM)的序列加倍后获得gp64TM double，将gp64TM double重组到pFastBacDual‑egfp，通过Bac‑to‑Bac系统获得重组杆状病毒AcMNPV‑gp64TM double‑egfp，AcMNPV‑gp64TM double‑egfp病毒较AcMNPV‑egfp相比，在宿主细胞中的增殖能力显著提高，并可减少对草地贪夜蛾幼虫的半致死时间。本发明的重组杆状病毒在制备防治草地贪夜蛾幼虫的微生物杀虫剂方面具有应用前景。
一种重组杆状病毒及其构建方法应用

[发明专利]一种人工改造的耐胰蛋白酶的植酸酶及其制备方法和应用-CN201810026493.4有效
发明人：梁爱华;王茜;付月君;张志云;杜军;王软林 -专利权人：山西大学
申请日： 2018-01-11 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明提供了一种人工改造的耐胰蛋白酶的植酸酶及其制备方法和应用，通过对已报道的植酸酶appA基因进行序列及结构分析，找出潜在的胰蛋白酶酶切位点，利用定点突变技术对该基因的胰蛋白酶酶切位点进行替换，获得突变基因appA‑M6,将突变基因构建到真核表达载体pPIC9上，转化到毕赤酵母GS115中，高效表达了耐胰蛋白酶的植酸酶appA‑M6。appA‑M6的最适pH值为4.5，最适反应温度为60℃，与野生型appA无明显区别。经过改良后的植酸酶appA‑M6对胰蛋白酶的耐受性提高，经胰蛋白酶处理后，野生型植酸酶appA已基本失活，appA‑M6残余酶活可达到30％，胰蛋白酶酶的耐受性提高了8.7倍。本发明改良后的植酸酶可在饲料添加剂中应用。
一种人工改造胰蛋白酶植酸酶及其制备方法应用