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[发明专利]一种电喷雾离子源纳喷雾喷针的制作方法-CN202110059063.4有效
发明人：高明霞;张祥民;王轩堂 -专利权人：复旦大学
申请日： 2021-01-17 - 公布日： 2022-05-20 - 主分类号： H01J49/16 文献下载
摘要：本发明属于高效率质谱离子源技术领域，具体为一种电喷雾离子源纳喷雾喷针的制作方法。本发明方法包括在毛细管内预先灌注填充物，再与使用与传统方法相同的技术制作石英毛细管喷针，可以一步得到喷口处通透、且喷口内径小的喷针。将本方法制作的内径20μm的喷针与商业化75μm喷针相比较，对于同一标准样品，其信号强度可以提高4.5倍。
一种喷雾离子源制作方法

[发明专利]一种多维液相色谱分离牛奶中肠毒素C的方法及其系统-CN202111258501.6在审
发明人：宋明辉;林梅英;王轩堂;秦峰;杨美成;刘浩 -专利权人：上海市食品药品检验研究院
申请日： 2021-10-27 - 公布日： 2022-02-25 - 主分类号： G01N30/89 文献下载
摘要：本发明公开了一种多维液相色谱分离牛奶中肠毒素C的方法及其系统，其中方法包括以下步骤：步骤S1：选择二维分离模式，搭建二维液相色谱平台，包括第一维离子交换液相色谱和第二维反相液相色谱；步骤S2：牛奶通过二维液相色谱平台分离得到肠毒素C。本发明选择离子交换色谱与反相色谱的二维分离模式，借助于第一维离子交换色谱的快速分离，对牛奶基质进行一次预分离，通过中心切割法收集含有肠毒素目标分子的馏分，再经第二维反相色谱分析，可大大降低被分析组分在反相柱中的复杂性，从而提高其分离效率和灵敏度。
一种多维色谱分离牛奶毒素方法及其系统

[发明专利]一种多维液相色谱联用质谱检测牛奶中肠毒素C的方法-CN202111258502.0在审
发明人：宋明辉;林梅英;王轩堂;秦峰;杨美成;刘浩 -专利权人：上海市食品药品检验研究院
申请日： 2021-10-27 - 公布日： 2022-02-25 - 主分类号： G01N30/89 文献下载
摘要：本发明公开了一种多维液相色谱联用质谱检测牛奶中肠毒素C的方法，包括以下步骤：步骤S1：选择二维分离模式，搭建二维液相色谱平台，包括第一维离子交换液相色谱和第二维反相液相色谱；步骤S2：牛奶通过所述二维液相色谱平台分离得到馏分，所述馏分完整蛋白的质谱鉴定和酶解肽质谱鉴定，鉴定肠毒素C。本发明提供的多维液相色谱质谱联用检测牛奶中肠毒素C的方法，具有鉴定准确、快速有效、灵敏度高等优势。解决了现有ELISA方法准确性低的弊端，自动化程度高，提高了检测通量，降低了试验成本，结果判定方便准确，更加具有实用性。
一种多维色谱联用检测牛奶毒素方法

[发明专利]一种用于蛋白质复合物分离的阵列式二维液相色谱分离系统及分离方法-CN202110716073.0在审
发明人： 王轩堂;高明霞;张祥民 -专利权人：复旦大学
申请日： 2021-06-28 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于蛋白质复合物分离的阵列式二维液相色谱分离系统及分离方法。本发明使用两台二元色谱泵、一个多位分配阀、一个多通道分流器和一个四通阀，实现生物样品的在线高通量深度分离。含有蛋白质复合物的生物样品经过第一维离子交换色谱分离后进行在线交联衍生化反应，通过多位分配阀依次转移至多通道的第二维反相色谱捕集柱阵列进行捕集除盐。被捕集的蛋白质复合物通过反相色谱分离柱阵列得到深度分离并可进行后续分析鉴定。本发明方法可全自动完成蛋白质复合物的二维分离、在线衍生及馏分收集，其分离通量成倍于传统离线二维色谱方法，十分适合蛋白质组学及蛋白质相互作用研究所需的蛋白质复合物高通量深度分离。
一种用于蛋白质复合物分离阵列二维色谱系统方法

[发明专利]人血浆外泌体的快速、高纯分离方法-CN202110442538.8在审
发明人：高明霞;郑浩洋;王轩堂;严少涵;张祥民 -专利权人：复旦大学
申请日： 2021-04-23 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明属于液相色谱分离技术领域，具体为一种人血浆外泌体的快速、高纯分离方法。本发明首先通过高速离心将人血浆的凋亡小体、微囊泡除去，紧接着上样到琼脂糖凝胶小柱进行预分离，除去大部分尺寸较小的高丰度蛋白，例如人血清白蛋白、免疫球蛋白等；并将收集得到的馏分依次进行合并，超滤浓缩，最后利用高效液相体积排阻色谱分离，实现外泌体和干扰脂蛋白的分离，最终得到高纯的人血浆外泌体馏分。从血浆前处理开始到外泌体馏分的获得，整个过程不超过两个小时。免疫印迹的表征证明高密度脂蛋白（HDL）去除率能够达到95%，低密度脂蛋白或者极低密度脂蛋白（VHDL）去除率达到85%。
血浆外泌体快速高纯分离方法

[发明专利]八通道液相色谱馏分收集器-CN202110090594.X在审
发明人：高明霞;张祥民;王轩堂 -专利权人：复旦大学
申请日： 2021-01-23 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： G01N30/82 文献下载
摘要：本发明属于液相色谱分离技术领域，具体为八通道液相色谱馏分收集器。本发明馏分收集器包括馏分收集管、馏分收集适配器、导轨、馏分接口、适配器推杆、适配器放置装置、适配器收纳装置、控制装置；在控制装置控制下，通过适配器放置装置将载有空96孔板或空8联排管的馏分收集适配器放置到导轨上；适配器推杆将馏分收集适配器在导轨上推动并运送至馏分接口支架和升降接口处进行馏分收集；在每块馏分收集适配器完成馏分收集后，通过适配器收纳装置和适配器推杆的联动，将馏分收集适配器进行收纳保存。本发明可自动完成馏分收集适配器的放置、馏分的多通道同时收集和馏分收集适配器的收纳过程，可用于分析化学领域对复杂样品进行高通量深度分离。
通道色谱馏分收集

[发明专利]蛋白质N末端肽段的在线分离装置及使用方法-CN201610491898.6有效
发明人：张祥民;李兰婷;王轩堂 -专利权人：复旦大学
申请日： 2016-06-29 - 公布日： 2019-01-15 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：本发明属于生物分析和检测技术领域，具体为一种蛋白质N末端肽段的在线分离装置及使用方法。该装置包括：两台高压泵、六通阀、四通阀、三通阀、C18柱和巯基肽段捕集柱以及相关连接部件。本发明中，蛋白质固定于填充C18疏水性填料的毛细管柱中，进而进行柱上氨基封闭，柱上酶解，酶解肽段固相巯基衍生，巯基肽段捕集柱捕集非N末端肽段，实现N末端肽段的在线分离。固相的蛋白封闭反应可以减少除盐过程中的损失，简化实验步骤，缩短样品反应时间；同时，可以通过采用过量的衍生试剂，实现肽段高效快速的巯基衍生。本发明通过在线装置，使得反应时间缩短，减少样品转移，减少样品损失，缩短除盐等预处理步骤的耗时，提高蛋白质N末端肽段鉴定效果。
蛋白质端肽在线分离装置使用方法