本发明涉及微生物领域,公开了多肽和植物乳杆菌胞外代谢产物及它们的应用及诱导植物乳杆菌产细菌素的方法和鉴定方法,具体涉及SEQ ID NO:1多肽,含该多肽的植物乳杆菌胞外代谢产物及制备方法,该多肽和/或植物乳杆菌胞外代谢产物在诱导植物乳杆菌产细菌素中的应用,诱导植物乳杆菌产生细菌素的方法和鉴定产细菌素植物乳杆菌的方法。将该多肽和/或植物乳杆菌胞外代谢产物能诱导植物乳杆菌表达细菌素,植物乳杆菌基因中papA、papB、papC、papD四个与细菌素产生相关的基因的表达水平分别上调9.41,6.75,7.94及6.63倍。说明添加该多肽和/或植物乳杆菌的胞外代谢产物可诱导植物乳杆菌中相关基因表达。
本发明涉及一种抑菌生物保鲜膜的制备方法,适用于低温食品的保鲜包装领域,本发明利用的植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)Zhang‑LL CGMCC No.6936,经活化、扩大培养、离心取上清、硫酸铵沉淀、透析制备得到将植物乳杆菌素Zhang‑LL溶液,然后将植物乳杆菌素Zhang‑LL溶液均匀喷洒在PE膜或PVDC膜上,经烘箱干燥,制备得到生物保鲜膜。本发明制作的抑菌保鲜膜具有良好的贮藏稳定性,常温贮藏抑菌活性至少保持六个月以上,仍可发挥抑菌的功效。本发明制作的抑菌保鲜膜,工艺简单,成本低廉,无毒副作用,且具有很好的抑菌效果,适于工业化生产。同时Zhang‑LL植物乳杆菌素还具有耐高温的特性,高温加热后不会影响其抑菌效果。
本发明涉及一种植物乳杆菌植物亚种及其产抗单增李斯特菌细菌素的制备方法,适用于肉与肉制品、乳与乳制品、果蔬、即食食品防腐保鲜中。本发明从福建农贸市场的腊肉中筛选得到植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)Zhang‑LL(CGMCCNo.6936)。利用Zhang‑LL菌株发酵得到产细菌素的发酵液,采用pH值依赖的吸附‑解吸附法、阳离子交换层析法、反相高效液相色谱法提取与纯化Zhang‑LL菌株细菌素,效价提高了32倍,纯度提高了36.65倍。该细菌素可抑制单增李斯特菌等多种食源性致病菌,抑菌活性高,对热及酸碱稳定,且被人体蛋白酶降解,是一种天然安全的生物防腐剂。该方法操作简单、稳定、高效,来源方便,成本较低,适于工业化生产。
本发明名称为一种大肠杆菌和乳酸杆菌穿梭载体的构建及应用。本发明涉及基因工程技术领域,目的在于构建一种大肠杆菌与乳酸杆菌之间的穿梭载体,该载体被命名为pZLT3,其包含有如序列表SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。本发明的载体的突出优点在于:首次利用植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)Zhang-LL(保藏号为:CGMCC No.6936)菌株中天然质粒pZL3为骨架,其包含有如序列表SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。构建适用于大肠杆菌和乳酸杆菌的穿梭载体,这种载体在大肠杆菌和乳酸杆菌中都具有稳定遗传的特点。同时,由于乳酸菌天然质粒pZL3中包含乳酸菌细菌素蛋白表达的编码基因及全部调控基因,构建的穿梭载体可以直接用于在乳酸杆菌中表达乳酸菌细菌素蛋白。