本发明公开了一种快速鉴定核桃黑斑蚜的试剂盒及方法,属于昆虫分子鉴定领域。所述试剂盒包括具有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID No.2所示核苷酸序列的下游引物。所述方法包括:(1)获得待测蚜虫的基因组DNA;(2)利用上述上游引物和下游引物进行PCR扩增;(3)利用凝胶电泳分析PCR扩增产物。本发明的试剂盒特异性好,灵敏度高;采用特异引物进行PCR扩增来鉴定核桃黑斑蚜,操作简单、快速、高效,结果准确。利用本发明,核桃黑斑蚜的DNA最低检出浓度为0.188ng/μL。
本申请提供了花蓟马特异性SS‑COI引物,包括:Fi63‑4F:5'‑CGCTAAGTATTTTAATTCGG‑3’(SEQ ID No.1);Fi63‑4R:5’‑AGTGGCACTAGTCAGTTTCC‑3’(SEQ ID No.2)。本申请还提供了包含本申请所述的引物的用于特异性检测花蓟马的试剂盒。本申请还提供了本申请所述的引物或本申请所述的试剂盒在特异性检测花蓟马中的应用。本申请还提供了一种基于特异性SS‑COI引物的花蓟马PCR快速检测方法,包括:1)提取样品DNA;2)以步骤1)提取的DNA为模板,利用本申请所述的引物进行PCR扩增反应;3)分析PCR产物。