本发明公开了一种诊断猪猪脐带血猪瘟病毒野毒株的引物组、含有该引物组的试剂盒及其应用。诊断猪脐带血猪瘟病毒野毒株的引物如SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:4所示。本发明的引物组还可用于制备诊断猪脐带血猪瘟病毒野毒株的试剂盒,所述试剂盒包括外套引物、内套引物、阴性对照、阳性对照、2×PCR Mixture。本发明的引物组以及包含该引物组的试剂盒能够特异性地诊断猪脐带血病毒野毒株,并能特异性区分猪瘟疫苗毒和猪瘟病毒野毒,而且能将猪瘟病毒与牛病毒性黏膜腹泻病毒和羊边界病毒区分开来,并具有较高的灵敏度,可重复性好,检测结果真实可靠。该方法检测过程简便,检测时间短,结果判定简单。
本发明属于动物病原分子诊断技术领域,具体是涉及到一种A型塞尼卡病毒检测引物、试剂盒、病毒检测方法和应用,包括如下引物:SVA上游引物为SEQ ID NO.1:5’‑AGAATTTGGAAGCCATGC‑3’,SVA下游引物为SEQ ID NO.2:5’‑GAAACAGAYTGCAGCTTCTC‑3’,Y表示简并碱基,为碱基T或者C,本发明在保证高灵敏度和特异性的同时,提高检测准确度,降低假阳假阴几率。
本发明公开了一种检测脐带血中猪附红细胞体的实时荧光PCR试剂盒及其用途。该试剂盒是首次根据猪附红细胞体膜蛋白OxaA基因而研制的实时荧光PCR试剂盒,包括针对猪附红细胞体OxaA基因序列设计的Taqman荧光探针及引物,所述引物的序列如SEQ ID NO:1以及SEQ ID NO:2所示,所述荧光探针的序列如SEQ ID NO:3所示。本发明的实时荧光PCR试剂盒,具有特异性强、灵敏度高、准确度高和重复性优的优点,可以实现大通量样品的检测。本发明的试剂盒不仅可用于猪脐带血的附红细胞体病检测,也可用于常规血液与组织样品的检测,指导该病的预防,进行分子流行病学调查,评估疗效;同时通过脐带血还可达到母仔猪同时监测的目的,对于附红细胞体病的早期快速诊断、防控具有重要意义。
本发明公开了一种检测仔猪脐带血中猪等孢球虫的实时荧光PCR试剂盒及其用途。该试剂盒是首次根据猪等孢球虫18SrRNA基因而研制的实时荧光PCR试剂盒,包括针对猪等孢球虫18SrRNA基因序列设计的Taqman荧光探针及引物,所述引物的序列如SEQ ID NO:1以及SEQ ID NO:2所示,所述荧光探针的序列如SEQ ID NO:3所示。本发明的试剂盒能够特异性地检测仔猪脐带血中的猪等孢球虫,并具有较高的灵敏度,特异性强和重复性优,可以实现大通量样品的检测。并且本发明的试剂盒检测结果快速高效,不会造成样品交叉污染,同时达到母仔猪同时监测的目的。
本发明公开了一种PCR诊断猪细小病毒野毒感染的引物、含有该引物的试剂盒及其应用。PCR诊断猪细小病毒野毒感染的引物如SEQ ID NO:1以及SEQ ID NO:2所示。本发明的引物还可用于制备PCR诊断猪细小病毒野毒感染的试剂盒,所述试剂盒包括上游引物、下游引物、阴性对照、阳性对照、10×PCR缓冲液、Taq酶及dNTP。本发明的引物以及包含该引物的试剂盒能够特异性地区分猪细小病毒疫苗免疫与野毒感染,并具有较高的灵敏度,可重复性好,检测结果真实可靠。该方法检测过程中无需特殊仪器的使用,检测过程简便,检测时间短,结果判定简单。
本发明公开了一种检测鉴别猪脐带血中猪瘟病毒野毒株与疫苗株的双重实时荧光RT‑PCR试剂盒及其用途。该试剂盒包括一对引物和两条荧光探针,其中一对引物的序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示,两条荧光探针的序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。本发明试剂盒具有特异性强、灵敏度高、准确度高和重复性优的优点,同时本发明对同一个样品进行一次检测操作即可完成猪瘟病毒野毒株和疫苗株的鉴别检测,而且能够解决猪瘟病毒与同属的牛病毒性腹泻病毒和羊边界病病毒存在基因交叉的问题。本发明适用于科学研究及临床检测中对猪瘟病毒野毒株及疫苗株的快速鉴别检测,可用于精准评估和诊断母猪猪瘟病毒带毒排毒、仔猪潜在感染情况,还可应用于猪瘟疫苗的效果评估。
本发明公开了一种仔猪脐带血中猪流感病毒的实时荧光RT‑PCR试剂盒及其用途。该试剂盒是根据猪流感病毒M基因而研制的实时荧光RT‑PCR试剂盒,包括针对猪流感病毒M基因序列设计的Taqman荧光探针及引物,所述引物的序列如SEQ ID NO:1以及SEQ ID NO:2所示,所述荧光探针的序列如SEQ ID NO:3所示。本发明的试剂盒能够特异性地检测仔猪脐带血中的猪流感病毒,并具有较高的灵敏度,特异性强和重复性优,可以实现大通量样品的检测。并且本发明的试剂盒检测结果快速高效,不会造成样品交叉污染,同时达到母仔猪同时监测的目的。