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[发明专利]HSV1-H129-BAC及其变体的构建方法与应用-CN201511029238.8有效
发明人：罗敏华;曾文波;江海飞;赵非;谌章舟 -专利权人：中国科学院武汉病毒研究所
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2020-12-08 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及HSV1‑H129‑BAC及其变体，该病毒及其突变体带有细菌人工染色体BAC，能在特定的细菌内保持低拷贝的自我复制，解决了因疱疹病毒基因组过大而不能长时间保存、不能自我复制、不方便进行分子生物学突变改造的缺点。且该病毒及其突变体还带有GFP报告基因，大大拓展了疱疹病毒作为工具病毒的应用前景。本发明还提供了H129‑BAC及其变体的构建方法，通过该方法可使对H129进行改造获得H129‑BAC，并赋予H129‑BAC更多的变体种类；构建方法和H129及其变体组成了一个遗传改造平台,具有更多的应用可能。
hsv1 h129 bac 及其变体构建方法应用

[发明专利]顺行跨多级突触、跨神经元的示踪系统-CN201610976085.6有效
发明人：罗敏华;曾文波;江海飞;赵非;杨虹;宋一舸;谌章舟 -专利权人：中国科学院武汉病毒研究所
申请日： 2016-11-07 - 公布日： 2020-06-26 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明提供了一个重组单纯疱疹病毒1型(HSV‑1)毒株H129衍生的(H129‑derived)顺行跨多级突触、跨神经元的病毒示踪系统；所述示踪系统是一个重组单纯疱疹病毒1型(HSV‑1)毒株H129，包括两个或两个以上的荧光表达盒(fluorescence expression cassette)，插入到H129基因组的不同位点，其中每个荧光表达盒包含至少两个拷贝的荧光蛋白编码序列(fluorescent protein‑encoding sequence)，所述荧光蛋白编码序列前后排列，和至少一个连接子编码序列，两个荧光蛋白编码序列之间插入至少一个连接子编码序列,以便荧光蛋白编码序列和连接子序列转录成一个转录子；所述连接子编码序列编码一个连接子多肽；所述连接子多肽含有至少两个相邻氨基酸，他们间的肽键形成是非常低效的；因此，所述转录子被翻译时，由于所述连接子多肽阻碍肽键的形成，能够计量地产生至少两个非融合荧光蛋白。
顺行跨多级突触神经元系统

[发明专利]顺行跨单级突触神经示踪系统-CN201610976316.3在审
发明人：罗敏华;曾文波;江海飞;赵非;杨虹;宋一舸;谌章舟 -专利权人：中国科学院武汉病毒研究所
申请日： 2016-11-07 - 公布日： 2017-03-22 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明提供了顺行跨单级突触(monosynaptic transneuronal)病毒示踪系统,用于绘制在一个特定的脑核团的特殊类型神经元的直接后突触靶标；所述顺行跨单级突触病毒示踪系统包括H129衍生的重组缺陷型HSV‑1病毒，其包含整合的第一表达盒含有第一启动子、第一荧光蛋白编码序列，和抗性肽编码序列，其中第一表达盒代替整个或部分胸腺嘧啶核苷激酶(TK)基因序列，产生的H129衍生的重组缺陷型HSV‑1 H129病毒丧失TK功能(H129‑ΔTK‑tdT)；和AAV9衍生的重组AAV9辅助病毒(AAV9‑TK‑GFP和AAV9‑DIO‑TK‑GFP)，其包含整合的第二表达盒含有第二启动子、TK编码序列，连接子肽编码序列，和第二荧光蛋白编码序列，其中第二表达盒的TK表达使H129衍生的重组缺陷型HSV‑1病毒复制；其中所述第一和第二荧光蛋白编码序列编码不同的荧光蛋白。
顺行跨单级突触神经系统