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[发明专利]用于检测支原体的组合物和试剂盒-CN202310719274.5在审
发明人：于岩飞;冯志新;王佳;韦艳娜;邵国青;武昱孜;刘茂军;王丽;熊祺琰;刘蓓蓓 -专利权人：江苏省农业科学院;兽用生物制品（泰州）国泰技术创新中心
申请日： 2023-06-16 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明的提供用于检测支原体的组合物和试剂盒，属于生物技术领域。用于检测支原体的组合物，其特征在于是含有引物M‑F、引物M‑R和探针M‑P的水溶液；所述M‑F的序列如SEQ ID NO:1所示；M‑R的序列如SEQ ID NO:2所示；探针M‑P的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，5’端连接有荧光基团FAM，3’端连接有淬灭基团BHQ1。采用本发明组合物检测支原体，灵敏度高、特异性强、检测范围广。
用于检测支原体组合试剂盒

[发明专利]构建猪肺炎支原体小鼠发病模型的方法及鉴别猪肺炎支原体强弱毒株的方法-CN201711362236.X有效
发明人：谢星;邵国青;冯志新;甘源;韦艳娜;张磊;庞茂达;杨浩;张珍珍;王佳;武昱孜;刘蓓蓓;熊祺琰;刘茂军 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2017-12-18 - 公布日： 2021-07-16 - 主分类号： A01K67/02 文献下载
摘要：本发明提供构建猪肺炎支原体小鼠发病模型的方法及鉴别强弱毒株的方法，属于动物模型领域。构建方法是对小鼠进行两次攻毒，第一次攻毒后13‑15天，获得小鼠发病模型；第二次攻毒是在第一次攻毒后42‑54小时进行的；每次攻毒时，向每只小鼠的左右鼻孔各滴入至少25μL 109CCU/ml的猪肺炎支原体培养物，然后对每只小鼠腹腔注射至少50μL 109CCU/ml的猪肺炎支原体培养物。鉴别强弱毒株的方法是构建小鼠发病模型，通过对小鼠肺脏病变进行评分等鉴别强弱毒株。本发明弥补了猪肺炎支原体体外细胞模型不能模拟体内环境的缺陷，也解决了多株猪肺炎支原体菌株在本体动物猪上进行试验的成本和场地等饲养环境的制约。
构建肺炎支原体小鼠发病模型方法鉴别强弱

[发明专利]猪鼻支原体强毒株及其应用-CN201810198100.8有效
发明人：熊祺琰;王佳;邵国青;冯志新;华利忠;韦艳娜;甘源;吴猛;刘蓓蓓;武昱孜 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2018-03-12 - 公布日： 2021-01-29 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明提供猪鼻支原体强毒株及其应用，涉及微生物技术领域。本发明猪鼻支原体强毒株，是猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis）HEF16株，保藏号为CCTCC NO:M2017462。本发明还提供所述猪鼻支原体在建立猪鼻支原体攻毒发病模型中的应用，采用该强毒株的纯培养物攻毒，能够诱导包括多发性浆膜炎和关节炎在内的多种猪鼻支原体感染典型病症，毒力强，发病快，7天内即可出现典型临床表现，发病情况严重，且在不同背景猪上均可发病，可用于建立具有典型病症的猪鼻支原体发病模型，具有代表性。本发明还提供猪鼻支原体在制备灭活疫苗中的应用，该菌株免疫原性好，制备的灭活疫苗具有良好的攻毒保护效力。
支原体强毒株及其应用

[发明专利]一种猪干扰素α1与胸腺肽α1融合蛋白的制备技术-CN201410063007.8在审
发明人：王占伟;孙玉贤;武昱孜 -专利权人：南京洲邦生物科技有限公司
申请日： 2014-02-25 - 公布日： 2014-07-23 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及兽用生物制药领域，公开了一种猪干扰素α1与胸腺肽α1融合蛋白的制备技术。本发明的猪干扰素α1与胸腺肽α1融合蛋白制备技术，基本制备过程包括：根据GenBank已公布的猪干扰素α1（序列号DQ249000）基因序列及胸腺肽α1（序列号770552A）序列，合成扩增引物，融合扩增猪干扰素α1和胸腺肽α1的全基因序列，克隆并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶-干扰素α1-胸腺肽α1融合蛋白，检测鉴定，分离纯化融合蛋白。该融合蛋白较好地保持了猪干扰素α1和胸腺肽α1各自的生物功能，具有一定的保护细胞免受病毒攻击的活性和促进细胞表面受体表达的活性，为猪干扰素α1和胸腺肽α1融合蛋白制剂的工业化生产提供了技术支撑。
种猪干扰素胸腺肽融合蛋白制备技术

[发明专利]一种猪用广谱免疫增强制剂及制备方法-CN201410062985.0在审
发明人：王占伟;孙玉贤;武昱孜 -专利权人：南京洲邦生物科技有限公司
申请日： 2014-02-25 - 公布日： 2014-06-25 - 主分类号： A61K38/22 文献下载
摘要：本发明涉及兽用生物制药领域，公开了一种猪用广谱免疫增强制剂及制备方法。本发明的猪用广谱免疫增强制剂及制备方法，主要成分包括胸腺肽-干扰素融合蛋白和壳聚糖，制备的基本过程如下：（1）将壳聚糖溶解到醋酸-醋酸钠缓冲溶液中；（2）将胸腺肽-干扰素融合蛋白溶于多聚磷酸钠溶液中；（3）在磁力搅拌下，将（2）得到的溶液滴加到（1）得到的溶液中，室温下反应，从而获得了胸腺肽-干扰素融合蛋白-壳聚糖免疫增强制剂。该免疫增强制剂的生产工艺简单，生产环节可控性强，有利于广泛推广；而且实际使用量较单制剂的明显减少，效果更优于单制剂的效果，在猪病防控中能发挥积极的作用。
种猪广谱免疫增强制剂制备方法

[发明专利]一种猪支原体肺炎减毒活疫苗及其应用-CN201410038836.0有效
发明人：邵国青;熊祺琰;刘茂军;冯志新;韦艳娜;王海燕;白方方;甘源;王丽;张道华;刘冬霞;华利忠;武昱孜;白昀;王占伟 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2014-01-26 - 公布日： 2014-04-23 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪支原体肺炎减毒活疫苗及其应用，本发明筛选具有典型猪肺炎支原体感染同时无明显其他病原感染的猪肺脏病料，利用乳兔肺继代传至100代，然后分离猪肺炎支原体菌株，利用培养基进行连续传代，同时通过多个菌株的筛选获得猪肺炎支原体AN306，其保藏号为CCTCC M2012431。本发明还涉及基于该弱毒株制备的猪支原体肺炎活疫苗制剂，包含活的弱毒株、药学上可接受的载体或辅料，并可以包含佐剂，同时可以进一步含有其他病原的免疫原。本发明的猪支原体肺炎活疫苗可通过多种途径进行免疫，该疫苗能使动物获得抗猪肺炎支原体感染的保护能力。
种猪支原体肺炎减毒活疫苗及其应用

[发明专利]一种猪用广谱免疫增强制剂及制备方法-CN201310561139.9无效
发明人：王占伟;孙玉贤;武昱孜 -专利权人：南京洲邦生物科技有限公司
申请日： 2013-11-13 - 公布日： 2014-02-26 - 主分类号： A61K38/22 文献下载
摘要：本发明涉及兽用生物制药领域，公开了一种猪用广谱免疫增强制剂及制备方法。本发明的猪用广谱免疫增强制剂及制备方法，主要成分包括胸腺肽-干扰素融合蛋白和壳聚糖，制备的基本过程如下：（1）将壳聚糖溶解到醋酸-醋酸钠缓冲溶液中；（2）将胸腺肽-干扰素融合蛋白溶于多聚磷酸钠溶液中；（3）在磁力搅拌下，将（2）得到的溶液滴加到（1）得到的溶液中，室温下反应，从而获得了胸腺肽-干扰素融合蛋白-壳聚糖免疫增强制剂。该免疫增强制剂的生产工艺简单，生产环节可控性强，有利于广泛推广；而且实际使用量较单制剂的明显减少，效果更优于单制剂的效果，在猪病防控中能发挥积极的作用。
种猪广谱免疫增强制剂制备方法

[发明专利]兔出血症病毒RT-PCR检测方法-CN201310052271.7无效
发明人：贾广乐;苏国清;林祥梅;武昱孜;孙卫东 -专利权人：中国检验检疫科学研究院
申请日： 2011-03-15 - 公布日： 2013-06-12 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供了用于兔出血症病毒RT-PCR检测的引物。本发明还提供了含有上述引物的试剂盒，以及使用上述引物一步法RT-PCR检测兔出血症病毒的方法。本发明方法准确、可靠，灵敏度和特异性高，具有较好的临床应用价值。
出血病毒 rt pcr 检测方法

[发明专利]实时荧光定量检测猪鼻支原体的引物和探针-CN201210296912.9有效
发明人：白方方;邵国青;武昱孜;刘茂军;冯志新;熊祺琰 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2012-08-20 - 公布日： 2012-11-07 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种实时荧光定量检测猪鼻支原体的引物和探针，特别是用于猪鼻支原体的实时荧光定量PCR检测，属于生物技术领域。确定以猪鼻支原体P37基因保守区序列作为扩增靶序列，设计合成一对特异性引物和一条分子信标探针应用于猪鼻支原体的定量检测。根据不同浓度梯度的阳性质粒制作的定量标准曲线可以看出，不同梯度定量模板数的对数值与Ct值之间有较好的相关关系，其相关系数为0.999；同时，该检测方法具有很高的灵敏度，最低能检测到10个拷贝的病原体。对其他病原进行检测表明，该方法具有很好的特异性。
实时荧光定量检测支原体引物探针

[发明专利]猪鼻支原体巢式PCR检测方法-CN201210115339.7有效
发明人：白方方;邵国青;武昱孜;刘茂军;冯志新;熊祺琰 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2012-04-19 - 公布日： 2012-09-19 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种引起猪的多发性浆膜炎、关节炎、耳炎等的猪鼻支原体的巢式PCR检测方法，主要步骤包括：1）提取猪鼻支原体样品的DNA，低温保存备用；2）以一对特异性引物MhrP01、MhrP02对猪鼻支原体样品进行第一轮PCR扩增；3）以另一对特异性引物MhrP03、MhrP04对猪鼻支原体第一轮PCR产物进行第二轮PCR扩增；4）对扩增产物进行电泳检测。如果存在346bp的特异性条带，则确定所检测的病菌为猪鼻支原体。本方法在微量病原菌的存在下，都可以准确检出，只要有102CCU/mL病原菌存在，即可检测出。本发明的优点是检测速度快、特异性强、灵敏度高和易于推广。
支原体 pcr 检测方法

[发明专利]兔出血症病毒荧光定量RT-PCR检测方法-CN201110062529.2无效
发明人：贾广乐;苏国清;林祥梅;武昱孜;孙卫东 -专利权人：中国检验检疫科学研究院
申请日： 2011-03-15 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供了用于兔出血症病毒荧光定量RT-PCR检测的引物和TaqMan探针。本发明还提供了含有上述引物和探针的试剂盒，以及使用上述引物和探针采用一步法RT-PCR检测兔出血症病毒的方法。本发明采用一步法RT-PCR检测技术，在一管内连续完成反转录和定量PCR扩增，完全闭管扩增和检测，减少了多重操作污染的可能性，易于操作，减少加样过程中的体积损耗，保证结果的可信性，反转录得到的所有cDNA样品都用来扩增，灵敏度更高。
出血病毒荧光定量 rt pcr 检测方法

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