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[发明专利]禽腺病毒Hexon与鸡传染性法氏囊病病毒VP2融合抗原、亚单位疫苗及其制备方法-CN201710910231.X有效
发明人：刘云涛;郑朝朝;何平有;孙颖;吴亚婷;郁宏伟;鲍恩东;朱秀同;杨保收 -专利权人：瑞普（保定）生物药业有限公司
申请日： 2017-09-29 - 公布日： 2021-04-30 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种禽腺病毒Hexon与鸡传染性法氏囊病病毒VP2融合抗原、亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明的一种禽腺病毒Hexon与鸡传染性法氏囊病病毒VP2融合抗原，所述融合抗原包括禽腺病毒Hexon蛋白和鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白。所述融合抗原具有如下氨基酸序列：（1）由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；或（2）与序列SEQ ID No.1限定的氨基酸序列同源性在95%至100%编码相同功能蛋白质的氨基酸序列。本发明制得的亚单位疫苗的保护性抗原是融合抗原，融合抗原的生产采用基因工程发酵的方式制备，具有成本低、抗原纯度高、免疫原性好以及安全性高优点。
病毒 hexon 传染性法氏囊病 vp2 融合抗原单位疫苗及其制备方法

[发明专利]一种乙型脑炎病毒悬浮培养方法-CN201710168462.8有效
发明人：王尚尚;吕茂杰;王甜;苏建东;杨保收 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2017-03-21 - 公布日： 2021-02-05 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种乙型脑炎病毒悬浮培养方法，该技术方案依托于动物细胞的微载体培养技术展开。由于微载体为单层贴壁细胞的生长繁殖提供了更大的表面积，因此为细胞生长提供了一个均质的悬浮培养系统，利用微载体作为细胞定殖的物理支撑，再结合优化的培养条件，从而提高了细胞及病毒的培养密度。本发明实现了乙型脑炎病毒的规模化培养，提供大量的优质病毒抗原。同时，本发明克服了传统转瓶培养动物原代细胞生产的单批产量不高、批间差异大、产品质量不稳定、生产成本和污染机率高等缺陷。此外，本发明能连续培养、占地小、生产规模大、对细胞伤害小，克服了传统工艺占地空间大，培养不连续，生产成本高等缺点。
一种脑炎病毒悬浮培养方法

[发明专利]一种无乳链球菌型特异性抗血清的制备方法-CN201611189698.1有效
发明人：丁旭娜;吕茂杰;杨保收;付旭彬;梁武 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2016-12-20 - 公布日： 2020-11-10 - 主分类号： C07K16/12 文献下载
摘要：本发明提供了一种无乳链球菌型特异性抗血清的制备方法，该方法包括抗原的制备、家兔的筛选、免疫接种、血清的收获及鉴定。本发明首先通过无乳链球菌灭活疫苗对家兔进行基础免疫，然后使用灭活疫苗和灭活抗原进行加强免疫制备无乳链球菌型特异性抗血清。以本发明制备的无乳链球菌型特异性抗血清，相对于使用无佐剂无乳链球菌抗原，具有抗体效价高的优点；相对于使用弗氏佐剂免疫，具有价格低，安全性更高的优点；相对于使用活菌攻毒进行加强免疫，具有简便、安全性高的优点，同时使用家兔制备阳性血清，成本较低，具有突出的规模化应用前景。
一种链球菌特异性血清制备方法

[发明专利]一种猪肺炎支原体疫苗效力测定方法-CN201710517029.0有效
发明人：郑朝朝;张德宝;高晓磊;刘涛;郁宏伟;朱秀同;柳珊;杨保收 -专利权人：瑞普（保定）生物药业有限公司
申请日： 2017-06-29 - 公布日： 2020-04-03 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪肺炎支原体疫苗效力测定方法，属于生物技术领域，本发明方法包括以下步骤：（1）免疫动物；（2）血清采集、稀释；（3）支原体‑血清结合、培养；（4）结果判定。本发明使用血清学方法替代动物试验，操作简单，技术要求低，重复性强，特异性好，该方法的建立避免了免疫攻毒保护法结果判定的主观性，避免散毒，同时也为制定、优化仔猪免疫程序提供了依据，适用于普遍推广。
种猪肺炎支原体疫苗效力测定方法

[发明专利]一种猪圆环病毒3型(PCV-3)Cap蛋白病毒样颗粒的制备方法及应用-CN201911021335.0在审
发明人：李守军;黄金海;杨保收;付旭彬;吕茂杰;厚华艳 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2019-10-25 - 公布日： 2020-01-14 - 主分类号： C07K14/01 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白病毒样颗粒的制备方法及应用。基于对PCV3流行毒株的Cap蛋白基因序列的比对分析，在人工合成PCV3‑Cap蛋白编码基因前端添加酵母表达信号肽序列，并对Cap基因的密码子进行优化，利用酿酒酵母转录元件高效构建方法构建重组酿酒酵母表达菌株，经诱导表达产生重组猪圆环病毒的病毒样颗粒。利用本发明的重组酿酒酵母表达菌株所表达的Cap蛋白制备亚单位疫苗，免疫动物后可诱导机体产生特异性免疫反应，并能保护猪体对抗猪圆环病毒的攻击。
重组酿酒酵母病毒样颗粒猪圆环病毒表达菌株构建特异性免疫反应制备亚单位疫苗信号肽序列转录比对分析编码基因酵母表达流行毒株免疫动物酿酒酵母诱导表达圆环病毒密码子猪体制备种猪诱导对抗攻击应用优化

[发明专利]禽腺病毒毒株、灭活疫苗及制备方法-CN201610508988.1有效
发明人：王帅;韩佳丽;郁宏伟;刘涛;何平有;朱秀同;杨保收;梁武;刘超 -专利权人：瑞普(保定)生物药业有限公司
申请日： 2016-07-01 - 公布日： 2019-12-31 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明提供禽腺病毒毒株、灭活疫苗及制备方法。本发明所述禽腺病毒毒株命名为禽腺病毒TJ株，保藏号为CCTCC NO:V201632；所述病毒毒株为禽腺病毒Ⅰ亚群中的C种，血清型为4型，病毒核酸为双股DNA，无囊膜；病毒颗粒直径为70～90nm，呈20面体对称结构；所述灭活疫苗由禽腺病毒经接种细胞、收获毒液、灭活和乳化制备而得。所述疫苗毒株为流行毒株，免疫原性好，增殖能力强，制备的疫苗具有安全性高，稳定性好，免疫应答产生迅速，攻毒保护率高等优点。
病毒疫苗制备方法

[发明专利]一种纯化猪肺炎支原体的方法-CN201611182567.0有效
发明人：张英;吕茂杰;杨保收;付旭彬;梁武 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2016-12-20 - 公布日： 2019-10-29 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明提供了一种纯化猪肺炎支原体的方法，该技术方案以抗原培养液直接作为原料，先后经澄清处理、超滤浓缩、洗滤三步处理即告完成，在此基础上基于实验手段设计了所采用的工艺装置，利用中空纤维膜剪切力低、容尘量高的特点，并优化了操作条件，通过跨膜压、剪切速率的限定保证了抗原自身稳定，并确保了杂质去除率。应用本方法纯化猪肺炎支原体抗原，不进行浓缩的情况下，抗原回收率达到87.8％以上，抗原液中猪血清去除60.7％；5倍浓缩后杂蛋白去除率达98％，抗原回收率62％，猪血清含量与原抗原液相比降低90.3％。同时，由于本方法处理量大、处理速度快、操作简单、工艺稳定，因此可以实现自动化或半自动化生产。
一种纯化肺炎支原体方法

[发明专利]一种利用较低血清含量营养物培养DF1细胞以制备鸡传染性法氏囊病毒的方法-CN201610777582.3有效
发明人：冯玉斗;李亚杰;付旭彬;杨保收;李守军 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2016-08-31 - 公布日： 2019-10-29 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用较低血清含量营养物培养DF1细胞以制备鸡传染性法氏囊病毒的方法，属于兽用生物制品技术领域，主要包括以下步骤：S1.制备用细胞的传代与培养；S2.驯化细胞适应低血清培养基；S3.驯化细胞适应低血清培养环境；S4.细胞种毒的繁殖；S5.收获病毒液的处理；S6.收获病毒液的TCID50测定。本发明提供的方法主要是利用纤连蛋白(FN)促细胞生长、提高细胞贴壁率，增强细胞的代谢水平使细胞适应低血清的培养环境后，再逐步去除纤连蛋白(FN)，通过此方法可获得适应低血清培养的DF1细胞，可显著降低生产成本，能够快速稳定的扩大生产规模，质量易于实现均衡稳定。
低血清细胞细胞适应制备鸡传染性法氏囊病毒培养环境纤连蛋白驯化病毒液营养物低血清培养基兽用生物制品传代代谢水平快速稳定扩大生产细胞生长细胞贴壁细胞种毒收获去除繁殖均衡

[发明专利]一种犬干扰素冻干制品-CN201610202463.5有效
发明人：孙晨;苏建东;杨保收;付旭彬;梁武;李守军 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2016-03-31 - 公布日： 2019-05-14 - 主分类号： C07K14/555 文献下载
摘要：一种犬干扰素冻干制品，涉及冻干生物制品技术领域，所述的犬干扰素冻干制品由犬干扰素原液和冻干保护剂冻干制成，其中冻干保护剂基液由pH缓冲剂及蛋白保护剂组成，所述的冻干保护剂中还包括耐热保护剂、填充剂和冻干加速剂。本发明制备的犬干扰素冻干制品，能在2～8℃条件下长期保存；由于加入了冻干加速剂，缩短了在大规模工业化生产中冻干工艺环节的冻干时间，提升了冻干效率并保证了冻干充分，保证了不同批次产品的稳定性；优选的耐热保护剂与填充剂组合提升了犬干扰素蛋白链抗断裂强度，提高了犬干扰素冻干制品的生物学活性和产品出品率。
一种干扰素制品

[发明专利]一种用于TGEV、PEDV二联冻干活疫苗的耐热保护剂、其制备方法及应用-CN201610202461.6有效
发明人：丁旭娜;吕茂杰;杨保收;付旭彬;梁武;李守军 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2016-03-31 - 公布日： 2019-01-18 - 主分类号： A61K47/42 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于TGEV、PEDV二联冻干活疫苗的耐热保护剂、其制备方法及应用。该耐热保护剂由以下重量百分比的成分组成：明胶1～3％，乳糖2～10％，水解乳蛋白0.5～3％，海藻糖1～6％，L‑精氨酸0.1～3％，谷氨酸钠1～3％，聚乙烯吡咯烷酮2～8％，水余量。较常规蔗糖明胶成分的耐热保护剂而言，以本发明耐热保护剂所制备的TGEV、PEDV二联冻干活疫苗安全有效、稳定性高，病毒抗原冻干损失率低，耐热性能良好，保存期长。由于针对该耐热保护剂匹配了适宜的冻干工艺，进一步促进了其对抗原的保护效果，并提升了冻干效率。所制备疫苗在37℃放置14日后病毒含量下降不超过0.5个滴度；在2～8℃保存30个月后，仍保持冻干后的外形，病毒含量仍≥10^5.0TCID₅₀；其真空度、剩余水分等各项检验均合格。
一种用于 tgev pedv 二联干活疫苗耐热保护制备方法应用

[发明专利]一种耐热保护剂、猪瘟耐热保护剂活疫苗及其制备方法-CN201511000682.7有效
发明人：何平有;邹立宏;刘涛;柳珊;韩佳丽;郑朝朝;郁宏伟;朱秀同;梁武;杨保收 -专利权人：瑞普（保定）生物药业有限公司
申请日： 2015-12-29 - 公布日： 2018-12-11 - 主分类号： A61K47/42 文献下载
摘要：本发明公开了一种耐热保护剂、猪瘟耐热保护剂活疫苗及其制备方法，属于生物技术领域。一种耐热保护剂，组方成分包括蔗糖10～15%，聚乙烯吡咯烷酮2～6%，聚赖氨酸2～4%，酶解明胶0.5～3%，柠檬酸钠0.2～1%，硫脲2～10%，牛血清白蛋白2～6%，芦布若尔1～4%，余量为水；将半成品病毒液与耐热保护剂混合，冷冻干燥，制成猪瘟耐热保护剂活疫苗。本发明通过添加耐热保护剂，降低了病毒在冷冻和真空干燥过程中损伤，提高了产品在保存和使用中的稳定性；本发明方法制备的猪瘟耐热保护剂活疫苗，实现了储运过程中冷藏保存，保存期延长到2～8℃保存36个月。
一种耐热保护猪瘟疫苗及其制备方法

[发明专利]一种猪乙型脑炎病毒抗体阳性血清的制备方法-CN201510907101.1有效
发明人：丁旭娜;吕茂杰;杨保收;付旭彬;梁武 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2015-12-08 - 公布日： 2018-10-16 - 主分类号： C07K16/08 文献下载
摘要：本发明提供了一种猪乙型脑炎病毒抗体阳性血清的制备方法，该方法包括疫苗的制备、阴性猪的筛选、免疫接种、阳性血清的收获及鉴定。本发明首先通过猪乙型脑炎活疫苗(SA14‑14‑2株)进行对阴性猪进行基础免疫，然后使用经浓缩纯化技术制备的高效价的猪乙型脑炎灭活疫苗(SA14‑14‑2株)进行强化免疫制备猪乙型脑炎病毒抗体阳性血清。以本发明制备的猪乙型脑炎病毒抗体阳性血清，相对于使用乙脑强毒制备阳性血清，避免了使用强毒的风险，具有安全性高的优点；同时使用猪制备阳性血清较小鼠收获的血清量大，相对成本较低，具有突出的规模化应用前景。
种猪脑炎病毒抗体阳性血清制备方法

[发明专利]一种猪瘟活疫苗的制备方法-CN201510380369.4有效
发明人：郑朝朝;徐倩倩;郁宏伟;刘涛;柳珊;梁武;朱秀同;杨保收;邹立宏;王帅 -专利权人：瑞普（保定）生物药业有限公司
申请日： 2015-07-02 - 公布日： 2018-08-21 - 主分类号： A61K39/187 文献下载
摘要：一种猪瘟活疫苗的制备方法，所述方法按以下步骤进行：a.生产用细胞的制备；b.制苗用毒液的制备；c.疫苗制备。本发明改进了猪瘟活疫苗的生产方法，提高了病毒感染率，简化了生产操作，提升了产品质量和产量，更适合于规模化生产。
一种猪瘟疫苗制备方法

[发明专利]一种鸡马立克氏病耐热保护剂活疫苗及其制备方法-CN201511000683.1有效
发明人：何平有;韩佳丽;邹立宏;马明;柳珊;郁宏伟;刘涛;梁武;朱秀同;杨保收 -专利权人：瑞普（保定）生物药业有限公司
申请日： 2015-12-29 - 公布日： 2018-07-27 - 主分类号： A61K39/245 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸡马立克氏病耐热保护剂活疫苗及其制备方法，属于生物技术领域。本发明鸡马立克氏病耐热保护剂活疫苗由病毒液与耐热保护剂混合冻干而成；其耐热保护剂组方包括：蔗糖8～10%、聚乙烯吡咯烷酮2～4%、聚赖氨酸3～6%、酶解明胶1～2%、乳蛋白水解物2～6%、谷氨酰胺0.4～1%、L－精氨酸0.05～0.5%、甘油1～4%、芦布若尔2～5%；本发明通过胰酶冷消化、接毒后添加辅助液提高生产效率、降低成本；通过添加耐热保护剂，降低了病毒在冷冻和真空干燥过程中损伤，提高了产品在保存和使用中的稳定性；本发明方法制备的鸡马立克氏病耐热保护剂活疫苗，实现了储运过程中冷藏保存，保存期延长到2～8℃保存36个月。
耐热保护剂活疫苗制备鸡马立克氏病马立克氏病种鸡聚乙烯吡咯烷酮生物技术领域真空干燥过程保存期延长胰酶冷消化明胶储运过程谷氨酰胺聚赖氨酸冷藏保存生产效率病毒液辅助液精氨酸乳蛋白水解物保存甘油蔗糖冻干酶解冷冻损伤病毒

[发明专利]一种用于犬病毒性腹泻的治疗药物-CN201711338158.X在审
发明人：李守军;王甜;郁宏伟;杨保收;梁武;苏建东;刘海霞;李蓬飞 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2017-12-14 - 公布日： 2018-06-08 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于犬病毒性腹泻的治疗药物，该技术方案选择eae基因作为细菌黏附素表达基因，首先构建了共表达犬α干扰素及细菌黏附素的重组载体，并以原核表达系统表达，产物经GST亲和层析纯化后得到犬α干扰素和细菌黏附素的融合蛋白，从而实现了犬α干扰素在人消化道内的靶向性，增加了肠上皮细胞局部干扰素浓度和作用时间。口服该融合蛋白可显著提升犬α干扰素的治疗效果并延长药效时间，对犬细小病毒病的治疗具有积极的促进作用。
犬α干扰素细菌黏附犬病毒性腹泻融合蛋白治疗药物干扰素技术方案选择犬细小病毒病原核表达系统肠上皮细胞表达基因促进作用人消化道治疗效果重组载体靶向性共表达构建治疗

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