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[发明专利]一种四环素双价适配体序列及非酶免标记检测方法-CN202111170432.3有效
发明人：李相阳;许文涛;兰欣悦;朱龙佼;杜再慧 -专利权人：北京农学院;中国农业大学
申请日： 2021-10-08 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明提出一种四环素双价适配体序列的设计及其非酶免标记传感器。理性地设计出具有G‑四链体形成潜力的双价四环素适配体序列，并基于硫黄素T(ThT)可被G‑四链体结构强激发荧光信号，成功将四环素靶标加入前后适配体序列的结构变化转换为ThT信号输出，实现了20min内对牛奶样品中残留四环素的定量检测，具有快速、特异性强、高灵敏等优点，和实际样本现场检测的应用潜力。
一种四环素双价适配体序列非酶免标记检测方法

[发明专利]一种新型铜基纳米材料及其在抗氧化和抑菌方面的应用-CN202310753310.X有效
发明人：许文涛;杜再慧;王鹏飞;朱龙佼;陈可仁 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2023-06-26 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： B22F9/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种新型铜基纳米材料及其在抗氧化和抑菌方面的应用。首次以CSIA恒温扩增产物为模板，通过化学还原法合成了两种铜基纳米材料CSIA‑Cu@Pt和CSIA‑Cu@Ag。并且发现CSIA‑Cu@Pt具有类过氧化物酶活性，对TMB和H2O2的KM分别为0.01 mM和0.05 mM，Vmax分别是1.674×10‑7 M‑1 s和97.29×10‑7 M‑1 s；CSIA‑Cu@Ag具有抑菌活性，抑菌机制主要是由于纳米材料的加入引起了细菌内部的氧化应激，进而导致DNA的氧化损伤，引起细菌破裂。
一种新型纳米材料及其氧化方面应用

[发明专利]一种三叶草结构自延伸等温扩增方法及其应用-CN202310752516.0有效
发明人：许文涛;杜再慧;朱龙佼 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2023-06-26 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明公开了一种三叶草结构无引物快速自延伸等温扩增方法及其应用。对CSIA扩增机制进行探究，以该扩增产物作为CuNCs的合成模板，生成红色荧光的CSIA‑CuNCs，基于此开发一种基于CSIA扩增的铜纳米簇通用检测方法，具体检测步骤包括（1）CSIA扩增模板的合成；（2）CSIA恒温扩增体系；（3）CSIA‑CuNCs生成体系；（4）荧光信号检测。实现了T4 DNA连接酶、T4 PNK和MicRNA 21的通用检测。
一种三叶草结构延伸等温扩增方法及其应用

[发明专利]一种弓形虫闭管可视化检测试剂盒及其检测方法-CN202210939572.0在审
发明人：许文涛;张素英;林晟豪;朱龙佼;杜再慧 -专利权人：中国农业大学;山东第一医科大学（山东省医学科学院）
申请日： 2022-08-05 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12Q1/6893 文献下载
摘要：本发明提供一种弓形虫闭管可视化检测试剂盒及其检测方法。该弓形虫检测试剂盒包含如下组分：市售PCR管、SPA恒温扩增体系、以及H+响应相关试剂。本发明将SPA恒温扩增和pH指示剂BTB结合起来，并联用智能手机的RGB分析技术，实现了对弓形虫的闭管检测，具有快速、特异性强、高灵敏、抗干扰强、可视化、操作便捷等特点。
一种弓形虫可视化检测试剂盒及其方法

[发明专利]一种靶向协同降脂的纳米双药制备及应用-CN202210708094.2有效
发明人：许文涛;田晶晶;朱龙佼;杜再慧 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2022-06-22 - 公布日： 2022-09-02 - 主分类号： A61K9/51 文献下载
摘要：本发明公开了一种装载天然产物靶向协同降脂的功能核酸纳米双药的制备方法及应用。利用oxyethyleneglycol bridge修饰核酸适体药物通过PCR扩增获得双侧5’端带有核酸适体粘性末端的扩增子，将纯化扩增子、焦磷酸根、镁离子、天然产物在70℃下进行一锅法自组装，得到功能核酸纳米双药。该纳米双药具有脂肪靶向性、粒径可压缩性、高效装载与刺激响应释放性等特性，在细胞水平与活体水平，能够实现细胞水平与活体水平的协同肥胖治疗。本发明制备核酸纳米药物的方法简单、成本低廉，非常适用于天然产物的递送与生物医学应用。
一种靶向协同纳米制备应用

[发明专利]一种核酸纳米酶的制备方法及传感应用-CN202210738626.7有效
发明人：许文涛;杜再慧;王鹏飞;朱龙佼 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2022-06-28 - 公布日： 2022-09-02 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种核酸纳米酶的制备方法及传感应用。本研究通过高温一步自组装的方法合成了两种核酸纳米酶，分别是单链核酸纳米酶和双链核酸纳米酶。单链核酸纳米酶是通过核酸序列为模板，加入金属盐溶液，在高温条件下孵育几分钟获得；双链双链核酸纳米酶是在单链核酸纳米酶的基础上增加一条杂交互补核酸序列，通过高温退火获得。该核酸纳米酶不仅具有类过氧化物酶活性，同时具有酶活可调控性，即通过对核酸序列、反应浓度、银铂比、孵育温度和孵育时间等反应条件优化，实现核酸纳米酶的酶活调控；还将双链核酸纳米酶利用到重金属离子的特异性传感检测中。
一种核酸纳米制备方法传感应用

[发明专利]一种基于纳米材料修饰电极快速定量检测单增李斯特菌的电化学发光检测方法-CN202210276043.7在审
发明人：崔丽伟;许文涛;常惟丹;陈威风;杜再慧;舒友琴;王璐;岳晓禹;刘俊桃;刘志景 -专利权人：中国农业大学;河南牧业经济学院
申请日： 2022-03-21 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： G01N27/26 文献下载
摘要：本发明构建了一种基于纳米材料修饰电极快速定量检测单增李斯特菌的电化学发光检测方法。首先，采用Hummers法制备氧化石墨烯GO；其次，以GO为原料，以甘氨酸为还原剂，采用还原法制备氧化锌三维氮掺杂石墨烯(ZnO‑3DNGH)；再次，用ZnO‑3DNGH复合材料修饰电极以增强电极的导电性能；最后，通过交流阻抗法和循环伏安法对修饰电极的电化学行为进行捕捉，实现信号输出。本方法具有高灵敏度、高特异性，成本低、线性范围广，检测限(S/N＝3)为5CFU.mL‑1，整个过程快速高效，结果可靠，有效解决了微生物检验时间长、检测成本高的难题。
一种基于纳米材料修饰电极快速定量检测李斯特电化学发光方法

[发明专利]一种微生物检测的双适配体功能核酸恒温微流控芯片传感器-CN202210401824.4有效
发明人：许文涛;周子琦;朱龙佼;张文强;杜再慧 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2022-04-18 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：本发明公开了一种微生物检测的双适配体功能核酸恒温微流控芯片传感器。将样品液、磁性捕获复合体‑哑铃型探针、RCA‑发光体系、缓冲液滴加到微流控芯片上，通过阀门和外界磁场的控制，实现可蜡样芽孢杆菌的分离、富集与检测；其中蜡样芽孢杆菌的适配体是通过全细胞筛选、裁剪获得，具有高亲和性和特异性。同时该传感器具有功能齐全，简单便携，可在1小时内完成检测，无需扩大培养等优点。
一种微生物检测双适配体功能核酸恒温微流控芯片传感器

[发明专利]一种用于检测β-乳球蛋白的双功能G-四链体变构生物传感器-CN202210057605.9有效
发明人：许文涛;田洪涛;王鑫昕;陈可仁;朱龙佼;杜再慧;田晶晶 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2022-01-19 - 公布日： 2022-04-19 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于检测β‑乳球蛋白的双功能G‑四链体变构生物传感器，包括：（1）β‑乳球蛋白双功能G‑四链体适配体设计；（2）β‑乳球蛋白生物传感器反应条件优化；（3）β‑乳球蛋白的检测。设计原理是基于β‑乳球蛋白生物传感器序列在引入检测靶标前后发生构象变化，对G‑四链体/氯化血红素（Hemin）DNA仿生酶的过氧化氢酶活产生影响，进而实现β‑乳球蛋白的检测。G‑四链体序列响应靶标浓度，使得其催化3,3',5,5'‑四甲基联苯胺（TMB）显色后溶液呈现出相应的比色梯度，最终实现了β‑乳球蛋白简便、快速、低成本、超灵敏的比色检测。
一种用于检测球蛋白功能四链体变构生物传感器

[发明专利]一种基于光纤倏逝波荧光生物传感器的外泌体检测方法-CN202111521834.3有效
发明人：朱龙佼;许文涛;李舒婷;杜再慧 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2021-12-14 - 公布日： 2022-03-18 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明提供一种基于光纤倏逝波荧光生物传感器的外泌体检测方法，包括：（1）外泌体‑信号探针结合体系，（2）S‑EWFB检测分析体系。本发明对信号探针进行双标记，一端修饰信号分子，一端修饰疏水分子，通过疏水相互作用将双标记的信号探针嵌入外泌体膜上，使得一个外泌体表面连接多个信号分子，进一步利用光纤表面修饰了特异性适配体的倏逝波传感平台对反应样品进行荧光信号的实时监测与分析。本发明以光纤倏逝波荧光检测仪为终端检测平台，实现了对外泌体的简单、快速、实时、高灵敏的连续定量检测。不仅如此，本发明提供的光纤检测平台具有良好的表面再生能力。
一种基于光纤倏逝波荧光生物传感器体检方法

[发明专利]激活产热基因对应功能核酸位点的调控-CN202111523616.3有效
发明人：许文涛;兰欣悦;朱龙佼;杜再慧;陈旭;陈可仁 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2021-12-14 - 公布日： 2022-03-18 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种激活产热基因的功能核酸调控办法，首先在人线粒体解偶联蛋白UCP1启动子区域上发现五条具有形成G四链体潜力的序列，然后利用天然功能性小分子辣椒素、姜黄素、大麻二酚对Ucp1启动子进行调控，通过双荧光素酶报告系统及胞内ThT成像联合评判，Ucp1启动子表达上调。本申请为天然功能性小分子调控代谢提供了基因水平的全新理论依据和机制阐述；为代谢新药筛选和代谢药物新靶点的选择提供思路和启发；为天然功能性小分子在代谢性疾病中的有效利用寻求了新的科学支撑。
激活基因对应功能核酸调控

[发明专利]基于引物设计和铜纳米簇的SARS-CoV-2德尔塔变异株检测方法-CN202111527238.6有效
发明人：许文涛;杜再慧;朱龙佼 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2021-12-15 - 公布日： 2022-03-04 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于引物设计和铜纳米簇的SARS‑CoV‑2德尔塔变异株检测方法。该方法结合DPO引物和AT引物成功区分了单碱基缺失的SARS‑CoV‑2德尔塔变异株和SARS‑CoV‑2野生菌株。并且DPO引物和AT引物的PCR产物可以作为CuNCs的生成模板，在紫外照射下实现SARS‑CoV‑2德尔塔变异株的可视化检测。本申请利用常规实验条件，借助PCR仪将DPO引物和AT引物结合扩增，使其SARS‑CoV‑2德尔塔变异株检测具有特异性、高灵敏、可视化的优势。
基于引物设计纳米 sars cov 德尔塔变异检测方法

[发明专利]一种恩诺沙星的快速检测方法-CN202111028967.7有效
发明人：陈威风;许文涛;崔丽伟;杜再慧;常惟丹;文英会;王璐;庄军辉;岳晓禹 -专利权人：中国农业大学;河南牧业经济学院
申请日： 2021-09-03 - 公布日： 2021-12-10 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明构建了一种恩诺沙星的均相快速检测方法，首先筛选得到一条高特异性的恩诺沙星适配体，然后通过合理的碱基互补配对设计，使其形成稳定的发卡结构。当靶标存在时与发卡适配体结合，发生构象改变，最终通过发卡适配体荧光基团的距离变化引起的荧光能量传递实现恩诺沙星的快速检测。即靶标不存在时荧光处于猝灭状态，而靶标存在时能够恢复荧光。本方法具有高灵敏度、高特异性，且快速简便，在6 min内即可实现对恩诺沙星的定量检测，并将特异性识别和定量信号输出合二为一，有效解决了传感器制备复杂、测定时间长的难题。
一种恩诺沙星快速检测方法

[发明专利]一种基于金纳米识别适配体冗余碱基的方法-CN202110716945.3有效
发明人：许文涛;朱龙佼;肖星凝;王蒙;黄昆仑;杜再慧;贺晓云;宋锐豪;李相阳 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2021-06-28 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： G01N21/78 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于金纳米识别适配体冗余碱基的方法，以展青霉素PAT原始适配体链为例。其中PAT原始适配体序列是本申请人首次发现的PAT高亲和性核酸序列，在此基础上利用DNA结构预测软件mfold预测78‑mer的PAT适配体的二级结构，通过逐渐剔除侧翼碱基得到一系列截短适配体。然后，依据适配体与金纳米和靶标PAT之间的亲和力不同，通过在高盐条件下金纳米无核酸序列保护会发生聚沉伴随颜色变化，进而实现适配体冗余碱基的识别。同时结合定点突变和圆二色谱技术（CD）确定了PAT适配体的冗余碱基和核心序列。本申请利用AuNPs比色法具有肉眼可判定、不需要大型仪器设备的优势，可以扩展应用于其他的靶标适配体的截短研究。
一种基于纳米识别适配体冗余碱基方法

[发明专利]一种基于超速PCR与功能核酸的可视化检测方法-CN202010765006.3在审
发明人：许文涛;黄昆仑;田晶晶;李舒婷;杜再慧 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2020-04-07 - 公布日： 2021-10-12 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明提供一种基于超速PCR与功能核酸的可视化检测方法，采用优化的超速PCR反应体系进行检测，比传统方法更快捷、更灵敏，具备特异性强、灵敏度高、检测结果可靠等优点，可以简化分析检测步骤，缩短分析时间，更重要的是使长度为600bp‑2000bp或更长的DNA长靶标片段检测成为可能，便于携带和野外作业，在包括食品安全和快速检测领域的微生物检测领域，具有非常好的应用前景。
一种基于超速 pcr 功能核酸可视化检测方法

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