本发明公开了一种引入二硫键提高木聚糖酶热稳定性的方法,属于基因工程技术领域。本发明通过对氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的木聚糖酶的第106位的缬氨酸突变为半胱氨酸和第156位的丙氨酸突变为半胱氨酸,或,第108位的丝氨酸突变为半胱氨酸和第129位的天冬酰胺突变为半胱氨酸,得到的突变体酶V106C/A156C、S108C/N152C在55℃孵育5min,相对酶活分别为85.6%和92.4%,比酶活为217U/mg和239U/mg,较野生型酶分别提高了27.3%和40.2%。在pH 2.0‑9.0间很稳定,孵育1h仍能保持70%以上的酶活力,具有在饲料、食品等领域广泛使用的前景。